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【发明授权】通过设计和改造二硫键交联位点的SLC膜蛋白复合物的制备方法_中国科学院广州生物医药与健康研究院_202311158832.1 

申请/专利权人:中国科学院广州生物医药与健康研究院

申请日:2023-09-08

公开(公告)日:2024-03-12

公开(公告)号:CN117198390B

主分类号:G16B15/20

分类号:G16B15/20;C07K14/47;C12N15/85

优先权:

专利状态码:有效-授权

法律状态:2024.03.12#授权;2023.12.26#实质审查的生效;2023.12.08#公开

摘要:本申请提供的SLC膜蛋白复合物的制备方法,通过预测选取突变后半胱氨酸空间距离小于的SLC膜蛋白进行氨基酸位点突变,突变后的SLC膜蛋白直接可以形成稳定的二硫键。采用本申请SLC膜蛋白复合物的制备方法得到的SLC膜蛋白复合物能够稳定存在于溶液中且具备生理活性,蛋白产量显著提升,在冷冻电镜下膜蛋白颗粒均一性好,符合作为冷冻电镜样品进行高分辨结构解析的需求。其次,通过本申请的SLC膜蛋白复合物的制备方法制备得到的SLC膜蛋白复合物有助于SLC家族蛋白在冷冻电镜下的高分辨结构解析。可以获取氨基酸底物与SLC膜蛋白结合口袋的结构信息,以及与周围氨基酸残基的相互作用信息。这些信息进一步应用在基于冷冻电镜结构的SLC家族蛋白药物筛选中。

主权项:1.SLC膜蛋白复合物的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:根据目标蛋白1和目标蛋白2的结构预测信息,参照SLC膜蛋白复合物三维结构进行拟合,生成所述目标蛋白1和所述目标蛋白2的复合物的预测模型;根据所述复合物的预测模型确定所述目标蛋白1和目标蛋白2之间可能形成二硫键的位点,从位点中选出空间距离小于的位点作为改造位点;将所述目标蛋白1和所述目标蛋白2中的改造位点的氨基酸突变为半胱氨酸,分别形成目标蛋白1’和目标蛋白2’,目标蛋白1’和目标蛋白2’通过二硫键连接,制备SLC膜蛋白复合物;所述目标蛋白1与所述目标蛋白2各自独立地包括SLC3A2、SLC7A5、SLC7A6、SLC7A7、SLC7A8、SLC7A10和SLC7A11中的至少一种。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国科学院广州生物医药与健康研究院 通过设计和改造二硫键交联位点的SLC膜蛋白复合物的制备方法

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