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【发明公布】一种外泌体分离提取方法_上海循源生物科技有限公司_202410002960.5 

申请/专利权人:上海循源生物科技有限公司

申请日:2024-01-02

公开(公告)日:2024-03-19

公开(公告)号:CN117721062A

主分类号:C12N5/00

分类号:C12N5/00

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.04.05#实质审查的生效;2024.03.19#公开

摘要:本发明公开了一种外泌体分离提取方法,包括以下步骤:步骤一:将待分离的生物样本与PBS缓冲液按照比例混合,使用搅拌器对其进行搅拌,搅拌速度为60‑180rpm,本发明通过将生物样本与PBS缓冲液混合,可以更好的保护外泌体的结构与生物活性,通过将沉淀物与上清液分离,上清液通过动态滤膜装置过滤,收集滤膜洗涤后离心得到上清液,重复至少二次,以保障分离产量,将收集到的上清液用超速离心机进行离心,并通过滤膜孔径更加细小的动态滤膜装置分离收集外泌体,从而提高分离效果和纯度;通过使用搅拌器搅拌、离心机离心的技术手段,可有效快速的将生物样本中的外泌体快速分离提取出来,以提高分离提取效率。

主权项:1.一种外泌体分离提取方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一:将待分离的生物样本与PBS缓冲液按照比例混合,使用搅拌器对其进行搅拌,搅拌速度为60-180rpm,搅拌时间为9-16分钟;步骤二:将混合液的沉淀物与上清液分离,将上清液转移到离心管中,使用离心机以3000xg-5000xg的离心力离心8-12分钟,分离沉淀物和上清液;步骤三:将上清液加入至动态滤膜装置中进行过滤,在4.2℃-37.0℃,以100-200rpm的速度旋转动态滤膜装置,使生物样本中的外泌体通过滤膜进入至收集器皿中;步骤四:将收集的滤液用0.8%-2.2%的缓冲液洗涤,用离心机以5℃-16℃以1000-1500rpm的速度离心12-25分钟,收集上清液;步骤五:重复步骤二与步骤四至少二次,将收集到的上清液用超速离心机进行离心,并通过动态滤膜装置,分离收集外泌体。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 上海循源生物科技有限公司 一种外泌体分离提取方法

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