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申请/专利权人：山东康华生物医疗科技股份有限公司

摘要：本发明涉及一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条及试剂盒，涉及体外诊断技术领域，尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条包括底板，底板上从左到右依次搭接有样品垫、生物素化垫、靶向多肽金垫、硝酸纤维素膜和吸水纸，靶向多肽金垫上固相有靶向多肽金颗粒标记的人绒毛膜促性腺激素抗体2，浓度为15μgmL；生物素化垫上固相有生物素化的人绒毛膜促性腺激素抗体1，浓度为15μgmL，本发明可以兼容两种样本类型，使得生产过程中，节约耗材成本、人工成本及检测时间。

主权项：1.一种尿液唾液同检的人绒毛膜促性腺激素胶体金检测试纸条，其特征在于：包括底板（9），底板（9）上从左到右依次搭接有样品垫（1）、生物素化垫（8）、靶向多肽金垫（7）、硝酸纤维素膜（6）和吸水纸（5），靶向多肽金垫（7）上固相有靶向多肽金颗粒标记的人绒毛膜促性腺激素抗体2，浓度为15μgmL；生物素化垫（8）上固相有生物素化的人绒毛膜促性腺激素抗体1，浓度为15μgmL；所述靶向多肽金垫（7）的制备方法为：配制金重悬液，金重悬液由0.1molLpH8.5的Tris-HCL缓冲液、质量百分数为0.5%的BSA、质量百分数为10%的蔗糖、质量百分数为10%的海藻糖、质量百分数为0.2%的Proclin300配制而成，用金重悬液将靶向多肽金颗粒标记的人绒毛膜促性腺激素抗体2进行稀释后，即得靶向多肽金标记抗体工作溶液，喷涂于结合垫上，得到靶向多肽金垫（7）；所述靶向多肽金颗粒标记的人绒毛膜促性腺激素抗体2的制备方法包括如下步骤：（1）制备靶向多肽金溶液，制备的靶向多肽金粒径为200nm，包括以下步骤：A、取1.5mL的1.0×10-4gmL氯金酸水溶液，用蒸馏水稀释到30mL，搅拌并加热到80℃，5min后加入0.15mL质量百分数1%的柠檬酸三钠，继续加热15min，冷却至室温，即得金溶液；B、取30mL的1.0×10-4gmL氯金酸水溶液和1mL步骤A制得的金溶液，混合，搅拌并加热至沸腾，加入稳定剂聚乙烯吡咯烷酮0.1g，8min后迅速加入强还原剂硼氢化钾0.6mL，在沸腾下反应2min，自然冷却至室温，即得靶向多肽金溶液；（2）用步骤（1）制得的靶向多肽金溶液标记人绒毛膜促性腺激素抗体2，包括以下步骤：取步骤（1）中所得靶向多肽金溶液100mL，调节pH值至8.0，加入1.5mg人绒毛膜促性腺激素抗体2，再加入1mL20％牛血清白蛋白溶液，离心，弃去上清液，得沉淀物，加入金重悬液10mL，即得靶向多肽金颗粒标记的人绒毛膜促性腺激素抗体2；所述生物素化垫（8）的制备方法为：配制金重悬液，金重悬液由0.1molLpH8.5的Tris-HCL缓冲液、质量百分数为0.5%的BSA、质量百分数为10%的蔗糖、质量百分数为10%的海藻糖、质量百分数为0.2%的Proclin300配制而成，用金重悬液将生物素化的人绒毛膜促性腺激素抗体1进行稀释后，即得生物素化抗体工作溶液，涂布于结合垫上，得到生物素化垫（8）；所述生物素化的人绒毛膜促性腺激素抗体1的制备方法包括如下步骤：（1）用量筒量取超纯水倒入烧杯中；（2）用剪刀剪取适当长度透析袋，放入盛0.1MPB缓冲液的烧杯中，放到电阻炉上加热直至透析袋煮开；（3）取透析袋用超纯水冲洗干净，甩干，恢复室温；（4）用夹子夹住其中一边，将人绒毛膜促性腺激素抗体1稀释至2mgmL，加入透析袋中，用透析夹夹好，放入2000mL0.1MPB缓冲液中，2-8℃冰箱透析8小时，每隔2h更换一次0.1MPB缓冲液，每次用量为2000mL，更换4次；（5）透析完成后将人绒毛膜促性腺激素抗体1取出，即得到生物素化的人绒毛膜促性腺激素抗体1。

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