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【发明公布】一种克服十字花科植物自交不亲和反应的方法_华中农业大学_202410113662.3 

申请/专利权人:华中农业大学

申请日:2024-01-26

公开(公告)日:2024-03-26

公开(公告)号:CN117751840A

主分类号:A01H1/02

分类号:A01H1/02

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.04.12#实质审查的生效;2024.03.26#公开

摘要:本发明公开了一种克服十字花科植物自交不亲和反应的方法,涉及植物生物技术领域。本方法是使用自噬过程抑制剂渥曼青霉素处理自交不亲和的拟南芥及大白菜的柱头组织,再对处理过的柱头组织进行自花授粉,最后获得自交不亲和植株的自交种。本发明具有以下优点和积极效果:①本方法首次使用自噬过程抑制剂渥曼青霉素处理自交不亲和拟南芥及大白菜柱头,能有效克服其自交不亲和性,获得自交种。②本方法采用单一药剂处理,操作简便,效果稳定,不需要借助特殊工具设备。③利用本方法克服自交不亲和反应,在十字花科不同物种中具有稳定效果,为扩大自交不亲和系在杂种优势利用中的应用范围提供了理论和实践基础。

主权项:1.一种克服十字花科植物自交不亲和反应的方法,其特征在于:使用自噬过程抑制剂渥曼青霉素处理自交不亲和的拟南芥及大白菜的柱头组织,再对处理过的柱头组织进行自花授粉,最后获得自交不亲和植株的自交种;①开花前一天的自交不亲和拟南芥或大白菜花蕾进行去雄处理;②次日,配制拟南芥渥曼青霉素工作液:挖取适量保存于4℃的羊毛脂于1.5mL离心管中,置于50℃水浴锅中数分钟至完全融化,将渥曼青霉素母液1mM与羊毛脂按体积比1:2混合均匀,配制成终浓度为0.33mM的渥曼青霉素工作液;③配制大白菜渥曼青霉素工作液:将1μL渥曼青霉素母液10mM加入19μL超纯水中,配制成终浓度为0.5mM的渥曼青霉素工作液;④拟南芥渥曼青霉素处理:在体式显微镜下,用解剖针蘸取适量拟南芥渥曼青霉素工作液,小心涂布于去雄雌蕊的花柱周围,处理3小时;⑤大白菜渥曼青霉素处理:吸取1μL大白菜渥曼青霉素工作液滴加至去雄后的大白菜柱头上,处理2小时后小心吸干柱头上残留试剂,直至乳突细胞完全干燥后进行下一步;⑥授粉:取正在散粉的自交不亲和拟南芥或大白菜花药,对处理后的拟南芥或大白菜柱头进行人工授粉;⑦苯胺蓝染色观察花粉管萌发情况:将授粉后24小时的自交不亲和拟南芥及大白菜雌蕊取下置于固定液中固定,而后将雌蕊置于NaOH溶液中,将软化后的雌蕊置于苯胺蓝溶液染色,最后用荧光显微镜进行观察;⑧拟南芥授粉收获自交种。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 华中农业大学 一种克服十字花科植物自交不亲和反应的方法

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