申请/专利权人：山东康华生物医疗科技股份有限公司

申请日：2024-01-05

公开（公告）日：2024-04-02

公开（公告）号：CN117538520B

主分类号：G01N33/531

分类号：G01N33/531;G01N33/532;G01N33/576;G01N33/569

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.02#授权;2024.03.01#实质审查的生效;2024.02.09#公开

摘要：本发明涉及一种HBc‑IgM抗体检测试剂盒及其制备方法，涉及体外诊断技术领域，HBc‑IgM抗体检测试剂盒的制备方法包括标记垫的制备方法，标记垫的制备方法为：将HBcAg‑硅芯硒壳标记物和DNP‑硅芯硒壳标记物按4:1体积比混合均匀后喷射于玻璃纤维SB08上，即得标记垫，本发明采用硅芯硒壳纳米颗粒作为标记物，制备成本低，检测灵敏度高。

主权项：1.一种HBc-IgM抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于：包括标记垫的制备方法，标记垫的制备方法为：将HBcAg-硅芯硒壳标记物和DNP-硅芯硒壳标记物按4:1体积比混合均匀后喷射于玻璃纤维SB08上，即得标记垫，HBcAg-硅芯硒壳标记物和DNP-硅芯硒壳标记物均由硅芯硒壳纳米颗粒溶液作为示踪物标记制得；所述硅芯硒壳纳米颗粒溶液利用种子生长法，先对二氧化硅微球进行表面接枝改性，再在改性SNPs表面进行PEG修饰，以PEG修饰SNPs为硅芯种子，二氧化硒为生长液，在硅芯种子表面再生长硒壳层，制得核壳结构的硅芯硒壳纳米颗粒；所述硅芯硒壳纳米颗粒溶液制备方法包括如下步骤：S1、二氧化硅微球的制备：采用Stober法制备二氧化硅微球，制备过程中，通过调控氨水浓度制得粒径110nm的二氧化硅微球，经HNO3酸化、离心水洗，最终制得表面带正电荷的浓度为1mgmL的二氧化硅微球；S2、PEG修饰二氧化硅微球溶液的制备：对S1制得的二氧化硅微球进行表面接枝改性，丁二酸酐作为改性剂，进行表面羧基功能基团化，得羧基化二氧化硅微球；取10mL羧基化二氧化硅微球，加入10mLPEG溶液，常温条件下以500rpm高速搅拌30min，超声分散10min，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得PEG修饰二氧化硅微球溶液；S3、硅芯硒壳纳米颗粒溶液的制备：取50mL超纯水置于100mL烧杯中，加入0.2%阿拉伯胶、1%PVP作为稳定剂，搅拌溶解；加入S2制得的PEG修饰二氧化硅微球溶液10mL作为硅芯种子，加入0.3M二氧化硒10mL作为生长液，加入抗坏血酸10mL作为还原剂，常温条件下100rpm搅拌反应30min，使得胶体硒聚集在微球表面形成硒壳，离心水洗3次，10mL超纯水重悬得硅芯硒壳纳米颗粒溶液，4℃冰箱内保存待用；所述抗坏血酸的浓度为0.6-1.5M。

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