申请/专利权人：南通大学

申请日：2024-01-10

公开（公告）日：2024-04-09

公开（公告）号：CN117844912A

主分类号：C12Q1/6876

分类号：C12Q1/6876;C12Q1/6844;C12N15/11;G01N21/359;G01N21/76;G01N27/327

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.26#实质审查的生效;2024.04.09#公开

摘要：本发明属于生物检测技术领域，公开了一种ctDNA检测试剂盒及检测方法。试剂盒包括：用于目标ctDNA进行扩增的试剂，包括第一阶段扩增试剂和第二阶段扩增试剂；信号标记物TPA‑DCPPNPs；保护探针，用于猝灭TPA‑DCPPNPs的ECL信号；硫代捕获探针，用于捕获所述保护探针。检测方法为：将靶标两级扩增后，得到PER产物；制备双链捕获probe@protector探针；将信号标记物TPA‑DCPPNPs滴涂在玻碳电极上，然后修饰AuNPs，再修饰双链捕获probe@protector探针，封闭非特异性活性位点，然后与得到的PER产物共孵育，然后测定ECL信号。本发明检测方法线性检测范围宽且具有较低的检测限。

主权项：1.一种ctDNA检测试剂盒，其特征在于，包括：用于靶标扩增的试剂，所述试剂包括第一阶段扩增试剂和第二阶段扩增试剂；所述第一阶段扩增试剂用于对靶标进行第一阶段扩增；所述第二阶段扩增试剂用于对第一阶段扩增的产物进行进一步扩增；所述第一阶段扩增试剂包括H1和ExoIII；其中，H1为SEQIDNO.1所示序列；所述第二阶段扩增试剂包括H2、dNTP、DNA聚合酶、cleanerG和MgCl2；其中，H2为SEQIDNO.2所示序列；信号标记物TPA-DCPPNPs；保护探针，所述保护探针为BHQ3修饰的SEQIDNO.3所示核酸序列，用于猝灭TPA-DCPPNPs的ECL信号；硫代捕获探针，所述硫代捕获探针为巯基修饰的SEQIDNO.4所示核酸序列，用于捕获所述保护探针；所述检测试剂盒用于ctDNA的检测或辅助鉴定，所述检测或辅助鉴定以非疾病诊断为目的。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南通大学 一种ctDNA检测试剂盒及检测方法

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