申请/专利权人：济宁市第一人民医院(济宁市医学科学研究院)

申请日：2024-02-10

公开（公告）日：2024-04-09

公开（公告）号：CN117844955A

主分类号：C12Q1/689

分类号：C12Q1/689;C12Q1/6806;C12N15/11;C12R1/32

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.26#实质审查的生效;2024.04.09#公开

摘要：本发明属于生物医药技术领域，具体公开一种基于多基因扩增的海分枝杆菌样本快速鉴定方法。本发明建立了一种从纯化的菌落到含有海分枝杆菌的组织的一整套完整的DNA提取及海分枝杆菌特异性引物的组合的扩增方案，可以采用普通PCR或荧光PCR，相较于传统的培养法明显缩短检测时长，相较于组学的方法显著减少成本支出，操作简单易行，具有特异性及阳性率高，时间短，成本低等优点。

主权项：1.一种基于多基因扩增的海分枝杆菌样本快速鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：1选取NCBI数据库中细菌及海分枝杆菌基因组的基因进行初步筛选，确定细菌通用的16S基因、RPOB基因、热休克蛋白家族基因设计特异性引物，并分别命名为引物1、引物2、引物3和引物4；2普通PCR引物灵敏度验证；3荧光定量PCR引物特异性验证；4建立小鼠皮肤海分枝杆菌感染模型，待病灶形成后取感染部位新鲜组织，称取100mg感染组织，由DNA提取试剂盒提取新鲜组织DNA，取10ngDNA样本1、样本2、样本3和样本4对引物扩增；5取新鲜感染组织的DNA样本进行DNA扩增，分别进行1.5％琼脂糖电泳检测及荧光PCR图像采集；6采用石蜡包埋组织对DNA提取；7对石蜡包埋感染组织普通PCR检测。

全文数据：

权利要求：

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