申请/专利权人：江苏大学

申请日：2022-02-28

公开（公告）日：2024-04-09

公开（公告）号：CN114806984B

主分类号：C12N1/21

分类号：C12N1/21;C12N15/70;C12N15/60;C12N15/53;C12R1/19

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.09#授权;2022.08.16#实质审查的生效;2022.07.29#公开

摘要：本发明提供了一种联产3‑羟基丙酸和1,3‑丙二醇的基因工程菌EC01S7、构建方法和应用，属于生物工程技术领域；本发明中，利用基因工程和合成生物学技术，筛选和协同表达高活性醛脱氢酶和1,3‑丙二醇氧化还原酶同工酶来分摊代谢3‑羟基丙醛的负担，然后通过优化GabD4和YqhD的表达提高了3‑羟基丙酸和1,3‑丙二醇的产量，最后通过辅酶工程调控吡啶核苷酸转氢酶来提高辅酶NAD+和NADPH循环供应，进而促进3‑羟基丙酸和1,3‑丙二醇的深合成；所述高效联产3‑羟基丙酸和1,3‑丙二醇的基因工程菌缓解了毒性中间代谢物3‑羟基丙醛积累，并实现细胞内辅酶自给自足，实现了3‑羟基丙酸和1,3‑丙二醇的高效生产。

主权项：1.一种联产3-羟基丙酸和1,3-丙二醇的基因工程菌EC01S7，其特征在于，所述基因工程菌为EC01S7，EC01S7是在大肠杆菌E.coliW3110DE3中先表达甘油脱水酶及其再激活因子DhaB123-GdrAB，然后协同表达丙醛脱氢酶GabD4、1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶YqhD和膜结合型吡啶核苷酸转氢酶PntAB，最后敲除E.coliW3110DE3基因组中可溶型吡啶核苷酸转氢酶SthA基因而得到；所述DhaB123-GdrAB的核苷酸序列如SEQIDNo:1所示，氨基酸序列如SEQIDNo:2所示；所述GabD4的核苷酸序列如SEQIDNo:5所示，氨基酸序列如SEQIDNo:6所示；所GabD4基因的UTR优化为TAAGACGAAAAGAAGGAGATTAGAA（SEQIDNo:32）；所述YqhD的核苷酸序列如SEQIDNo:7所示，氨基酸序列如SEQIDNo:8所示；所述YqhD基因的UTR优化为TAAGCGCGGCGAAGGAGATAACAAC（SEQIDNo:34）所述PntAB的核苷酸序列如SEQIDNo:11所示，氨基酸序列如SEQIDNo:12所示；所述SthA的核苷酸序列如SEQIDNo:13所示，氨基酸序列如SEQIDNo:14所示。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 江苏大学 一种联产3-羟基丙酸和1,3-丙二醇的基因工程菌EC01 S7、构建方法和应用

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