申请/专利权人：中国矿业大学(北京);中国医学科学院北京协和医院

申请日：2023-12-29

公开（公告）日：2024-04-05

公开（公告）号：CN117491549B

主分类号：G01N30/89

分类号：G01N30/89

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.05#授权;2024.02.23#实质审查的生效;2024.02.02#公开

摘要：本发明涉及识别磷脂酰胆碱异构体的技术领域，具体涉及一种磷脂酰胆碱异构体的定性定量方法。本发明提供了一种基于负模式MRM质谱分析对PCs同时进行结构鉴定和定量的方法。该方法开创了一种结构驱动的碳碳双键位置异构鉴定策略，通过RPLC负模式MRM进行全面的PCs定性和定量分析。本发明的方法具有灵敏度高、特异性好等优点，同时具有较高的实用性和可靠性。此外，本发明方法简单，快速，不依赖于高分辨质谱，可以在没有标准品的情况下鉴定磷脂酰胆碱异构体，并能够同时进行具有高灵敏度和高选择性的定量分析。

主权项：1.一种磷脂酰胆碱异构体的定性定量方法，其特征在于，包括以下步骤：将含磷脂酰胆碱的待测物和内标物混合，进行萃取，得到待测液；将待测液进行反相液相色谱串联质谱检测，得到各未知异构体的保留时间，并根据MRM前体离子，确定各未知异构体的脂肪酸链；期间任何与同位素分布相关的峰都被RT移位滤波器有效地消除；于数据库获取含有所述脂肪酸链的磷脂酰胆碱异构体，基于采用神经网络程序ALOGPS预测每个磷脂酰胆碱异构体的油水分配系数LogPow；将同组的磷脂酰胆碱异构体和各未知异构体的保留时间以及油水分配系数LogPow均按照相同排列顺序排序，以匹配各未知异构体，从而得到各未知异构体的结构，实现磷脂酰胆碱异构体碳碳双键位置异构鉴定；根据内标物的质量、内标物的峰面积和各未知异构体的峰面积，得到各未知异构体的质量；反相液相色谱检测的条件包括：流动相体系为流动相A和流动相B，所述流动相A为含有甲酸铵和甲酸的水溶液-甲醇-乙腈体系；所述流动相B为含有甲酸铵和甲酸的甲醇溶液-异丙醇体系；所述流动相体系的流速为0.4mLmin；洗脱方式为梯度洗脱；所述梯度洗脱的程序为：0.0~0.5min：所述流动相B的体积百分含量为10%；0.5~7.0min：所述流动相B的体积百分含量由10%匀速增加到30%；7.0~47.0min：所述流动相B的体积百分含量由30%匀速增加到70%；47.0~47.1min：所述流动相B的体积百分含量由70%匀速减少到10%；47.1~50.0min：所述流动相B的体积百分含量为10%；所述质谱检测的条件包括：电喷雾离子源；MRM模式负离子模式扫描；所述流动相A中，所述含有甲酸铵和甲酸的水溶液中甲酸铵的浓度为5mM；甲酸的体积浓度为0.05%；所述流动相A中含有甲酸铵和甲酸的水溶液、甲醇和乙腈的体积比为1:1:1；所述流动相B中，所述含有甲酸铵和甲酸的甲醇溶液中甲酸铵的浓度为5mM；甲酸的体积浓度为0.05%；所述流动相B中含有甲酸铵和甲酸的甲醇溶液、异丙醇的体积比为1:1；所述反相液相色谱检测的色谱柱为WatersACQUITYUPLCBEHC8柱；柱温为40℃。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国矿业大学(北京);中国医学科学院北京协和医院 一种磷脂酰胆碱异构体的定性定量方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD