申请/专利权人：武汉爱基百客生物科技有限公司

申请日：2023-12-12

公开（公告）日：2024-04-12

公开（公告）号：CN117866871A

主分类号：C12N5/04

分类号：C12N5/04;C40B50/06;C12Q1/6869

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.04.30#实质审查的生效;2024.04.12#公开

摘要：本发明涉及分子生物学领域。本发明提供了一种适用于ATAC‑seq的植物叶片提取细胞核的方法，包括步骤：S1.液氮研磨得植物叶片组织粉末；S2.加入复合型细胞壁降解酶试剂对细胞壁进行酶解；S3.配制N种细胞核提取缓冲试剂，N＞1，采用差速离心法提取细胞核，每次离心后用所述N种细胞核提取缓冲试剂中的任一种重悬沉淀；S4.Percoll密度梯度离心分离去除杂质。本发明采用了复合型细胞壁降解酶试剂，不同酶在这一过程中展现出协同效应。本发明还提供了更适于差速离心的细胞核提取缓冲试剂的组分，NPB试剂使用CHAPS，不改变蛋白质活性但可裂解细胞膜；HEPES维持细胞核结构的稳定，利于保持细胞核的完整性，减少对后续建库、测序分析结果的影响。

主权项：1.一种适用于ATAC-seq的植物叶片提取细胞核的方法，其特征在于，包括步骤：S1.将植物叶片组织进行液氮研磨得植物叶片组织粉末；S2.取所述植物叶片组织粉末，加入复合型细胞壁降解酶试剂对细胞壁进行酶解，然后细胞筛过滤收集液体；S3.配制N种细胞核提取缓冲试剂，N＞1，采用差速离心法提取细胞核，每次离心后用所述N种细胞核提取缓冲试剂中的任一种重悬沉淀；S4.采用Percoll密度梯度离心的方法分离去除杂质，回收细胞核。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 武汉爱基百客生物科技有限公司 一种适用于ATAC-seq的植物叶片提取细胞核的方法及应用

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