申请/专利权人：河南省华之源生物技术有限公司

申请日：2024-01-22

公开（公告）日：2024-04-16

公开（公告）号：CN117887826A

主分类号：C12Q1/6869

分类号：C12Q1/6869

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.03#实质审查的生效;2024.04.16#公开

摘要：本发明公开了一种由脂质体囊泡介导的纳米孔测序方法，涉及基因组测序领域，首先在流体池内的两个半池中构成闭合回路，之后缓慢用注射器向有机相中吹打多个由脂质体形成的囊泡，注射器内孔蛋白与测序样品被包裹在一个个囊泡中，在电场驱动下使囊泡游离在通道孔附近后，将其刺破，则通道周围的单质分子层变成双脂质分子层，控制易位电压使孔蛋白插入双脂质分子层中在两半池中间形成纳米孔，在纳米孔附近加入控速蛋白，从而驱动纳米孔附近的测序样品核酸以设定的易位速度持续过孔测序。本发明方法能够通过调控蛋白的调速，实现较高的测序速度，且纳米孔测序过程稳定，操作简单，效率高，能够实现较高的捕获率。

主权项：1.一种由脂质体囊泡介导的纳米孔测序方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、在流体池内分离出体积相同的两个半池，且二者之间设有100μm的通道孔，一个半池中加入有机相溶液，另一个半池中加入水相；所述有机相中混有两亲性脂质溶液，从而在靠近通道孔处形成单脂质分子层，所述水相为导电缓冲液；两个半池分别与单独的AgAgCl电极连接，并电连接到放大器，形成一个闭合回路；S2、将测序样品和成孔蛋白添加至注射器中，缓慢用注射器向有机相中吹打多个由脂质体形成的囊泡，所述孔蛋白与测序样品被包裹在一个个囊泡中；S3、在电场驱动下使囊泡游离在通道孔附近后，将其逐个刺破，则通道周围的单质分子层变成双脂质分子层，控制易位电压使孔蛋白插入双脂质分子层中在两半池中间形成纳米孔；S4、在纳米孔附近加入控速蛋白，从而驱动纳米孔附近的测序样品核酸以设定的易位速度持续由有机相半池过孔至水相半池实现测序。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 河南省华之源生物技术有限公司 一种由脂质体囊泡介导的纳米孔测序方法

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