申请/专利权人:天津科技大学
申请日:2022-04-27
公开(公告)日:2024-04-16
公开(公告)号:CN114874959B
主分类号:C12N1/21
分类号:C12N1/21;C12N15/52;C12N15/54;C12N15/53;C12N15/60;C12N15/70;C12P13/04;C12R1/19
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.04.16#授权;2022.08.26#实质审查的生效;2022.08.09#公开
摘要:本发明公开了一种利用葡萄糖从头发酵生产L‑茶氨酸的基因工程菌,所述基因工程菌株含有用于茶氨酸合成的γ‑谷氨酰甲胺合成酶和编码茶氨酸从头合成途径酶的基因,所述茶氨酸从头合成途径酶包括磷酸解酮酶、转氨酶、乙醛脱氢酶、丙氨酸脱氢酶。本发明构建出从葡萄糖到茶氨酸的完整合成代谢途径,得到一株不携带质粒、无需添加乙胺、能利用葡萄糖稳定生产茶氨酸的基因工程菌株,该菌株发酵33h后,茶氨酸的产量可达到46gL,转化率可达0.16g茶氨酸g葡萄糖,生产强度可达1.4g茶氨酸Lh,是目前报道的不添加乙胺,直接利用葡萄糖从头发酵生产茶氨酸的最高产量、转化率和生产强度,具有良好的工业应用前景。
主权项:1.一种利用葡萄糖从头发酵生产L-茶氨酸的基因工程菌,其特征在于:所述基因工程菌株含有用于茶氨酸合成的γ-谷氨酰甲胺合成酶和编码茶氨酸从头合成途径酶的基因,所述茶氨酸从头合成途径酶包括磷酸解酮酶、转氨酶、乙醛脱氢酶、丙氨酸脱氢酶;所述基因工程菌株以E.coliATCC27325为出发菌株;编码γ-谷氨酰甲胺合成酶的基因来源于噬氨副球菌Paracoccusaminovorans;所述编码磷酸解酮酶、转氨酶、乙醛脱氢酶、丙氨酸脱氢酶的基因分别来源于双歧杆菌Bifidobacteriumadolescentis、恶臭假单胞菌Pseudomonasputida、大肠杆菌E.coli、球形芽孢杆菌Lysinibacillussphaericus;所述编码茶氨酸从头合成途径酶的基因由PT7或Ptrc启动子启动;所述编码茶氨酸从头合成途径酶的基因分别整合于大肠杆菌的ycgH、ycnI、fhiA、ygaY基因位点;所述基因工程菌株含有γ-谷氨酰甲胺合成酶基因gmas、磷酸解酮酶基因xfp、转氨酶基因spuC、乙醛脱氢酶基因eutE和丙氨酸脱氢酶基因alD,其基因序列依次为SEQIDNO.1、SEQIDNO.2、SEQIDNO.3、SEQIDNO.4、SEQIDNO.5;编码磷酸解酮酶的基因xfp由PT7启动子启动。
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百度查询: 天津科技大学 一种利用葡萄糖从头发酵生产L-茶氨酸的基因工程菌、方法及应用
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