申请/专利权人：陕西森盛菌业科技有限公司

申请日：2023-06-06

公开（公告）日：2024-04-16

公开（公告）号：CN116694481B

主分类号：C12N1/14

分类号：C12N1/14;C12N1/02;C12R1/645

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.16#授权;2023.09.22#实质审查的生效;2023.09.08#著录事项变更;2023.09.08#专利申请权的转移;2023.09.05#公开

摘要：本发明提供一种天麻萌发菌的脱毒筛选方法，属于脱毒技术领域，包括：对萌发菌的退化菌种进行活化的活化工序，将所得退化菌种在脱毒培养基中进行菌丝尖端脱毒循环得到脱毒菌种的脱毒工序，和对脱毒菌种进行扩殖培养的扩殖工序；菌丝尖端脱毒循环进行4‑8次，待转接培养的菌种的菌丝生长速度显著高于退化菌种的菌丝生长速度，且连续三次转接培养的菌种的菌丝生长速度差异不显著，即视为脱毒结束；扩殖工序所得扩殖菌种用于保藏或天麻生产。该脱毒筛选方法的脱毒效果佳，脱毒成功率能达到95％以上，脱毒菌种和扩殖菌种都能在萌发菌菌种保藏和天麻生产中应用，解决了萌发菌菌种的退化和长势减弱问题，能避免萌发菌菌种退化影响天麻生产效益。

主权项：1.一种天麻萌发菌的脱毒筛选方法，其特征在于，包括：对萌发菌的退化菌种进行活化的活化工序，将所述活化工序所得退化菌种在脱毒培养基中进行菌丝尖端的脱毒循环得到脱毒菌种的脱毒工序，和对所述脱毒菌种进行扩殖培养的扩殖工序；所述菌丝尖端的脱毒循环进行4-8次；所述脱毒循环的过程如下：将菌种接种于装有脱毒培养基的平皿中，于22-26℃恒温培养，待菌落直径长至3-4cm后，切取菌落最边缘幼嫩菌丝尖端0.2-0.5mm转接在另一平皿中，再于22-26℃恒温培养至菌落直径为平皿23时，完成本次脱毒循环；所述脱毒工序的菌丝尖端的脱毒循环中，待转接培养的菌种的菌丝生长速度显著高于退化菌种的菌丝生长速度，且连续三次转接培养的菌种的菌丝生长速度差异不显著，即视为脱毒结束；所述扩殖工序得到的扩殖菌种用于保藏或天麻生产；所述脱毒培养基的原料包括：阔叶树木屑100-200g、麦麸30-70g、土豆200-400g、葡萄糖10-30g、磷酸二氢钾1-5g、硫酸镁0.5-3g、玉米粉15-25g、天麻10-20g、琼脂粉10-30g和蒸馏水；所述脱毒培养基的制备步骤如下：a）土豆去皮切片，将土豆与玉米粉、麦麸、阔叶树木屑、天麻加水煎煮30-60min，加水量以原料能全部被水浸透，并被水淹没即可；b）将所得煎煮液进行过滤，滤液加蒸馏水补足至800-1000mL；c）向所得溶液中加入琼脂粉，加热、搅拌至琼脂粉溶解，再加入葡萄糖、磷酸二氢钾、硫酸镁，溶解得到培养基溶液；d）将所得培养基溶液按常规方法分装、灭菌，即得脱毒培养基。

全文数据：

权利要求：

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