申请/专利权人:天津科技大学
申请日:2023-09-19
公开(公告)日:2024-04-19
公开(公告)号:CN117904166A
主分类号:C12N15/81
分类号:C12N15/81;C12N1/19;C12N15/31;C12R1/645
优先权:
专利状态码:在审-公开
法律状态:2024.04.19#公开
摘要:本发明属于生物工程技术领域,特别涉及鲁氏酵母内一种稳定且高效的质粒系统的构建。为了高效地实现对鲁氏酵母的基因编辑,解决含有酿酒酵母的着丝粒序列的质粒在鲁氏酵母内遗传稳定性差的问题,本发明的目的是提供一种可以在鲁氏酵母内稳定且高效表达的质粒系统,首先通过生物信息学方法预测鲁氏酵母源的ARS和CEN元件,将它们构成着丝粒型游离质粒,转入到出发菌株MQ1中,最后通过测定相应重组菌株的生长曲线以及质粒丢失率,发现具有鲁氏酵母源ARS和CEN元件的质粒转入鲁氏酵母中表现出更高的遗传稳定性,获得了具有更好复制起始效率的ARS‑G3,更好遗传稳定性的CENE,稳定性良好的质粒pUC19‑Nrs‑ARS‑B2‑CENE。
主权项:1.一种鲁氏酵母内稳定且高效的质粒系统,其特征在于:其是通过生物信息学方法预测鲁氏酵母源的ARS和CEN元件,在基础质粒上引入ARS片段、CEN片段构建成pUC19-Nrs-ARS-CEN系列质粒;优选地,所述基础质粒为pUC19-Nrs质粒。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 天津科技大学 一种鲁氏酵母内稳定且高效的质粒系统及其构建方法
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