申请/专利权人：中山大学附属第七医院(深圳)

申请日：2022-05-09

公开（公告）日：2024-04-19

公开（公告）号：CN114874975B

主分类号：C12N5/071

分类号：C12N5/071;C12N5/09;C08G81/00

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.19#授权;2022.08.26#实质审查的生效;2022.08.09#公开

摘要：本发明公开了一种利用弹性蛋白水凝胶培养类器官的方法，是将可溶性弹性蛋白溶解于去离子水或缓冲溶液中，配制成弹性蛋白水溶液；然后加入丙烯酸酯‑聚乙二醇‑N‑羟基琥珀酰亚胺或甲基丙烯酸酯‑聚乙二醇‑N‑羟基琥珀酰亚胺，得到改性弹性蛋白，在去离子水中透析，结冰，冻干，得到干态的改性弹性蛋白；再将所述干态的改性弹性蛋白溶解于磷酸盐生理缓冲溶液中，加入光引发剂，然后与类器官细胞团混合，在一定波长的光源下辐照，得到弹性蛋白水凝胶细胞复合物；再在类器官培养基下培养，细胞在水凝胶中进行扩增，得到类器官。本发明的工艺简单、反应快速、弹性蛋白含量高，培养得到的类器官质量稳定。

主权项：1.一种利用弹性蛋白水凝胶培养胃癌类器官的方法，其特征在于，包括下述步骤：（1）将0.5~2质量份可溶性弹性蛋白溶解于100份去离子水或缓冲溶液中，配制成弹性蛋白水溶液；（2）在所述弹性蛋白水溶液中，加入0.1~1质量份丙烯酸酯-聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺或甲基丙烯酸酯-聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺，常温充氮气避光条件下进行反应，得到改性弹性蛋白；所述丙烯酸酯-聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺或甲基丙烯酸酯-聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺中聚乙二醇的聚合度为4~20；（3）将所述改性弹性蛋白在去离子水中透析，将透析后的改性弹性蛋白水溶液置于-15°C环境中使其结冰，然后在冻干机中冻干，得到干态的改性弹性蛋白；（4）将所述干态的改性弹性蛋白0.5~20质量份溶解于100份磷酸盐生理缓冲溶液中，加入光引发剂，配制成弹性蛋白水凝胶前驱体溶液；然后在所述前驱体溶液中加入甲基丙烯酸酯化明胶并溶解，得到复合水凝胶前驱体溶液；（5）将胃癌组织消化成单细胞悬浮液，进行细胞计数，然后离心得到细胞团；将所述复合水凝胶前驱体溶液与细胞团混合，然后在光源下辐照，得到水凝胶-细胞复合物；再将所述水凝胶-细胞复合物在胃癌类器官培养基下培养；在培养基及水凝胶作用下，水凝胶包裹的细胞中的上皮细胞会在水凝胶中进行扩增，形成胃癌类器官。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中山大学附属第七医院(深圳) 一种利用弹性蛋白水凝胶培养类器官的方法

免责声明
1、本报告根据公开、合法渠道获得相关数据和信息，力求客观、公正，但并不保证数据的最终完整性和准确性。
2、报告中的分析和结论仅反映本公司于发布本报告当日的职业理解，仅供参考使用，不能作为本公司承担任何法律责任的依据或者凭证。

阅读全文 双屏查看 官方信息 专利公告 收藏专利 下载PDF 下载WORD