申请/专利权人：浙江大学

申请日：2022-03-30

公开（公告）日：2024-04-19

公开（公告）号：CN114767876B

主分类号：A61K47/69

分类号：A61K47/69;A61K47/59;A61K47/64;B01J13/02;A61K35/76;A61P25/00;A61P9/10;A61K35/30

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.19#授权;2022.08.09#实质审查的生效;2022.07.22#公开

摘要：本发明公开了一种搭载噬菌体的复合多孔微球及其制备方法。复合多孔微球是由丝素微球搭载结合噬菌体形成；通过支链聚乙烯亚胺修饰微球表面电位转为正电位，通过静电引力吸附负电位的噬菌体，形成搭载噬菌体的复合多孔微球。本发明的复合多孔微球可搭载不同功能化的噬菌体从而呈现出不同的功能，并且复合多孔微球可以通过微创手术，使用注射器直接注射到病灶位置，为脑梗死等诸多疾病的治疗提供了新的方法和材料。

主权项：1.一种搭载噬菌体的复合多孔微球，其特征在于：所述的复合多孔微球是由丝素微球搭载结合噬菌体形成；所述的多孔微球的孔隙率在80%以上，大小为150–250μm，噬菌体搭载量为7.45×102PFUmg-6.51×1010PFUmg；所述复合多孔微球按照以下方式制备获得：S1、由蚕茧制备获得多孔丝素微球；所述的步骤S1具体为：S11、将蚕茧茧壳剪碎、脱胶、洗涤、干燥、溶解、透析和除杂后制备成2wv%的丝素蛋白溶液；S12、将石油醚在-80℃冷冻1h；S13、取S12冷冻获得的石油醚于烧杯中，加入司盘80，使混合均匀；S14、将S11获得的丝素蛋白溶液加入S13获得的石油醚溶液，搅拌；S15、将S14搅拌获得的溶液倒入S12冷冻获得的石油醚中，再置于-20℃冰箱静置沉降，在-20℃氛围下除去溶液中的石油醚，获得含冰晶的丝素蛋白微球沉淀，将丝素蛋白微球沉淀进行冷冻真空干燥即可制备出多孔丝素微球；S2、对多孔丝素微球进行去菌处理；所述的步骤S2具体为：S21、将多孔丝素微球浸入无水乙醇中静置48h；S22、将无水乙醇处理后的多孔丝素微球转移至体积分数为75%的乙醇溶液中静置，杀灭多孔丝素微球中的细菌；S23、将乙醇溶液中的多孔丝素微球用无菌PBS缓冲液洗涤，去除乙醇，将多孔丝素微球分散在PBS缓冲液中保存；S3、在多孔丝素微球上复合搭载制备噬菌体形成复合多孔微球；所述的步骤S3具体为：S31、将无菌支链聚乙烯亚胺溶液加入到多孔丝素微球中孵育，获得了吸附支链聚乙烯亚胺的多孔丝素微球；S32、将吸附支链聚乙烯亚胺的多孔丝素微球转移至无菌PBS缓冲液中，用PBS缓冲液洗涤，去除游离的支链聚乙烯亚胺成分；S33、扩增并纯化噬菌体，制备噬菌体溶液；S34、将噬菌体溶液加入到S32获得的吸附支链聚乙烯亚胺的多孔丝素微球溶液中，震荡孵育形成搭载噬菌体的复合多孔微球；S35、将S34获得的搭载噬菌体的复合多孔微球用无菌PBS缓冲液洗涤，去除游离的噬菌体，得到纯化的搭载噬菌体的复合多孔微球。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 浙江大学 一种搭载噬菌体的复合多孔微球及其制备方法

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