申请/专利权人：尹克奔

申请日：2024-01-30

公开（公告）日：2024-04-26

公开（公告）号：CN117925698A

主分类号：C12N15/82

分类号：C12N15/82;C12N15/29;A01H5/00;A01H6/46

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.04.26#公开

摘要：本发明提出了一种在优质水稻越光中缩短抽穗期的改良方法，属于水稻育种技术领域，本发明针对越光品种在东北稻区，生育期严重偏长的问题，通过基因编辑技术，将Ghd7，Ghd8和Hd1三基因的WWF类型转化为NWN倍型组合，实现越光水稻抽穗期的调控，缩短越光的抽穗期，从而获得可以引种至我国东北黑龙江地区的越光水稻优质品种；本发明提出的越光抽穗期改良方法，可以为创制适合多地种植的越光新品系提供支撑，也可为其它作物的性状改良提供借鉴。

主权项：1.一种在优质水稻越光中缩短抽穗期的改良方法，其特征在于，该方法具体步骤如下：1构建Ghd7-Hd1敲除材料的CRISPRCas9载体为了构建Ghd7-Hd1敲除材料的CRISPRCas9载体，每个基因设计2个敲除靶点，靶点位于基因的编码区；其中，Ghd7靶点一序列如序列4所示；Ghd7靶点二序列如序列5所示；Hd1靶点一序列如序列6所示；Hd1靶点二序列如序列7所示；通过PCR扩增上述靶点序列，分别选择OsU6a和OsU6b启动子驱动的表达盒，再通过GoldenGate的克隆方法将表达盒连接到双元载体pYLCRISPRCas9Pubi-H中；之后将重组质粒转化大肠杆菌，经过阳性克隆的筛选与测序，测序结果无误的克隆即为对应基因的CRISPRCas9载体；把重组质粒导入土壤农杆菌，首先用Ca2+处理农杆菌，使农杆菌转变为感受态；然后将重组质粒和感受态细胞在缓冲液中混合培养，使农杆菌吸收大肠杆菌中的质粒完成转化过程；3植物愈伤组织培养选取当年收取的水稻种子进行愈伤组织培养；4转染、筛选及分化使用农杆菌转染并培养后，筛选出黑色坚硬的抗性愈伤组织，待到抗性愈伤组织再生出黄色的新愈伤组织时，可进行分化并转移至分化培养基上，光照培养至苗高10cm移栽，获得缩短抽穗期的改良越光水稻苗。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 尹克奔 一种在优质水稻越光中缩短抽穗期的改良方法

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