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申请/专利权人：云南省农业科学院花卉研究所
申请日：2024-03-19
公开（公告）日：2024-04-26
公开（公告）号：CN117925706A
主分类号：C12N15/84
分类号：C12N15/84;A01H5/00;A01H6/14
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.05.14#实质审查的生效;2024.04.26#公开
摘要：本申请公开了一种色素万寿菊遗传转化方法。色素万寿菊遗传转化方法包括：从原农杆菌菌液中培养出的单菌落移入含有25mgL的利福平和50mgL的卡那霉素的固体YEB培养基中进行培养，从培养完成后的菌液中选取呈阳性的菌液进行保存作为目标农杆菌菌液，以使用目标农杆菌菌液制备重悬液；将去除种皮的色素万寿菊种子置于无菌水中进行催芽后移入重悬液中，加入silwettL‑77和乙酰丁香酮，摇匀后进行超声波处理，再经二次真空处理，从而完成对色素万寿菊种子的浸种转化以实现色素万寿菊遗传转化。该申请利用农杆菌浸种法实现色素万寿菊的遗传转化，只需要要成熟的种子，无需进行组织培养，是一种简单有效的实现色素万寿菊遗传转化的方式。
主权项：1.一种色素万寿菊遗传转化方法，其特征在于：包括以下步骤：（1）制备重悬液：从原农杆菌菌液中培养出的单菌落移入含有25mgL的利福平和50mgL的卡那霉素的固体YEB培养基中进行培养，从培养完成后的菌液中选取呈阳性的菌液进行保存作为目标农杆菌菌液，以使用所述目标农杆菌菌液制备重悬液；（2）种子预处理：将去除种皮的色素万寿菊种子置于无菌水中进行催芽；（3）农杆菌浸种转化：所述步骤（2）中完成催芽的色素万寿菊种子移入步骤（1）制备的重悬液中，加入silwettL-77和乙酰丁香酮，摇匀后进行超声波处理，再经二次真空处理后进行培养，从而完成对色素万寿菊种子的浸种转化以实现色素万寿菊遗传转化；（4）草铵膦筛选浓度的确定：使用乙醇、次氯酸钠和无菌水对所述实现色素万寿菊遗传转化的色素万寿菊种子进行消毒处理；将消毒处理后的色素万寿菊种子置于草铵膦溶液的无菌滤纸上。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 云南省农业科学院花卉研究所 一种色素万寿菊遗传转化方法
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