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申请/专利权人：浙江省中医院、浙江中医药大学附属第一医院(浙江省东方医院)
申请日：2023-12-07
公开（公告）日：2024-04-26
公开（公告）号：CN117925519A
主分类号：C12N5/078
分类号：C12N5/078;C12N5/0786;C12M1/00;C12M1/24;C12M1/22;A61K35/15;A61P19/08;A61P31/04
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.05.14#实质审查的生效;2024.04.26#公开
摘要：本发明公开了一种基于淫羊藿苷“训练”破骨细胞的破骨外泌体制备方法，通过给予质量可控的淫羊藿苷，并与破骨细胞共培养，提取经过“训练”的破骨细胞外泌体，可通过破骨‑成骨细胞间通讯作用，作用于成骨细胞，促进其增殖和矿化，应用于局部骨缺损的治疗；具有自体优势，生物安全性高等优点。上述制备的破骨细胞外泌体可应用到制备感染性骨缺损药物中。
主权项：1.一种基于淫羊藿苷“训练”破骨细胞的破骨外泌体制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：培养骨髓来源单核巨噬细胞，加入20ngmLM-CSF诱导；步骤2：诱导5d后，采用20ngmLM-CSF+50ngmLRANKL诱导破骨细胞；步骤3：3d后，更换淫羊藿苷“训练”破骨细胞，具体采用破骨细胞培养基动态收集系统“训练”破骨细胞；步骤4：收集的细胞上清液，以300×g离心10min后；继续取上清液，加入新管中，以2000×g离心10min；继续取上清液，加入另一新管中，以10000×g离心30min，再次取上上清液，以100,000×g在4℃下离心70min，并将沉淀用200μLPBS重悬，即为破骨外泌体。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 浙江省中医院、浙江中医药大学附属第一医院(浙江省东方医院) 一种基于淫羊藿苷“训练”破骨细胞的破骨外泌体制备方法
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