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申请/专利权人：大连理工大学
申请日：2023-12-29
公开（公告）日：2024-04-26
公开（公告）号：CN117929716A
主分类号：G01N33/543
分类号：G01N33/543;G01N33/53;G01N33/535;G01N21/64
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.05.14#实质审查的生效;2024.04.26#公开
摘要：本发明公开了一种基于单分子阵列免疫分析仪的内毒素检测方法，方法为：1对羧基磁珠表面羧基进行活化，与靶向肽进行偶联，形成靶向肽包被磁珠；2加入封闭液进行封闭；3加入内毒素进行孵育；4加入生物素化检测肽进行孵育；5加入链霉亲和素‑β‑半乳糖苷酶进行孵育；6将样品载入深孔板，加入试卤灵‑β‑D‑半乳糖吡喃糖苷，使用单分子阵列免疫分析仪进行检测。该方法通过形成“靶向肽包被磁珠‑内毒素‑生物素化检测肽‑链霉亲和素‑β‑半乳糖苷酶”复合物体系，经酶促反应产生荧光，通过统计荧光增长值得到内毒素浓度。上述体系的检测范围为０～200pgmL，检测限为0.2pgmL，实现了无需鲎试剂、操作简单且成本较低的内毒素检测。
主权项：1.一种基于单分子阵列免疫分析仪的内毒素检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1对羧基磁珠表面羧基进行活化，再与与靶向肽进行偶联，形成靶向肽包被磁珠；2偶联后的磁珠经缓冲液洗涤后，加入封闭液对羧基进行封闭，得到封闭后的靶向肽包被磁珠；3封闭后的靶向肽包被磁珠经缓冲液洗涤后，加入内毒素进行孵育，使内毒素与靶向肽相结合；4反应后的靶向肽包被磁珠经缓冲液洗涤后，加入生物素化检测肽进行孵育，形成靶向肽包被磁珠-内毒素-生物素化检测肽夹心体系；5反应后的靶向肽包被磁珠经缓冲液洗涤后，加入链霉亲和素-β-半乳糖苷酶进行孵育，形成靶向肽包被磁珠-内毒素-生物素化检测肽-链霉亲和素-β-半乳糖苷酶复合物体系；6复合物体系经缓冲液洗涤后，重悬于PBS上样液，载入深孔板，加入试卤灵-β-D-半乳糖吡喃糖苷，使用单分子阵列免疫分析仪进行检测。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 大连理工大学 一种基于单分子阵列免疫分析仪的内毒素检测方法
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