申请/专利权人：南方医科大学珠江医院

申请日：2024-02-01

公开（公告）日：2024-04-26

公开（公告）号：CN117925535A

主分类号：C12N5/10

分类号：C12N5/10;C12N15/867

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.14#实质审查的生效;2024.04.26#公开

摘要：本发明提供一种CAR‑T细胞的培养方法，包括如下步骤：S1：对细胞培养容器进行包被处理；S2：配置培养基，所述培养基包括自体血浆、AlyS505N0无血清细胞培养基以及Gomesin；S3：用含有的唑来膦酸的培养基调整PBMCs密度，然后加入细胞培养容器中；将细胞培养容器放置于培养箱中培养。S4：在细胞培养容器中加入Polybrene以及MesothelinCAR的慢病毒；放置入培养箱中培养。S5：在细胞培养容器中加入所述培养基，放置入培养箱中培养；S6：悬起细胞，并且收集细胞悬液，将所述细胞悬液转移至15mL离心管中，离心后弃除上清液，使用所述培养基悬起细胞沉淀，然后将细胞放置于新的所述细胞培养容器中，继续培养箱中培养；S7：采用半量换液或补液的方式调整细胞密度,培养12天后收获细胞。

主权项：1.一种CAR-T细胞的培养方法，其特征在于，包括如下步骤：S1：对细胞培养容器进行包被处理；S2：配置培养基，所述培养基包括自体血浆、AlyS505N0无血清细胞培养基以及Gomesin，所述Gomesin的氨基酸序列如SEQIDNO.1所示；S3：用含有5μM的唑来膦酸的培养基调整PBMCs密度，然后加入细胞培养容器中；将细胞培养容器放置于培养箱中，在第一培养条件下培养18h；S4：在细胞培养容器中加入Polybrene以及MesothelinCAR的慢病毒；在培养箱中，第二培养条件下培养48h；S5：在细胞培养容器中加入所述培养基，在培养箱中，第三培养条件下培养24h；S6：采用一次性移液管悬起细胞，并且收集细胞悬液，将所述细胞悬液转移至15mL离心管中，离心后弃除上清液，使用所述培养基悬起细胞沉淀，然后将细胞放置于新的所述细胞培养容器中，继续培养箱中，在第四培养条件下培养；S7：采用半量换液或补液的方式调整细胞密度,培养12天后收获细胞。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 南方医科大学珠江医院 一种CAR-T细胞的培养方法

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