申请/专利权人：安徽科技学院

申请日：2020-11-20

公开（公告）日：2024-04-26

公开（公告）号：CN112522368B

主分类号：C12Q1/6804

分类号：C12Q1/6804

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.26#授权;2021.04.06#实质审查的生效;2021.03.19#公开

摘要：本发明提供了一种用于检测DNA的免疫层析试纸条，属于免疫层析检测技术领域；所述免疫层析试纸条的结合垫上喷涂有检测探针与金纳米棒的偶联物；所述检测探针为5’端巯基修饰的单链DNA；所述检测探针与待检测DNA的核苷酸序列互补配对。本发明中，金纳米棒AuNRs具有可调谐和更强的可见近红外吸收、更高的表面增强拉曼散射截面、单向等离子体传播的可能性以及增强的光致发光。本发明基于AuNRs的免疫层析试纸条能够在短时间内对DNA进行灵敏和定量的视觉检测。经过对比试验，基于AuNRs的侧向流动传感器用肉眼能够检测到DNA最小浓度为10pM，比基于金纳米颗粒AuNPs的低20倍。

主权项：1.一种检测宫颈癌标记物HPV16的免疫层析试纸条，其特征在于，所述免疫层析试纸条由底板和顺次连接在底板上的样品垫、结合垫、测试垫和吸收垫组成；所述结合垫上喷涂有检测探针与金纳米棒的偶联物；所述检测探针为5’端巯基修饰的单链DNA；所述检测探针与待检测DNA的核苷酸序列互补配对；所述检测探针的核苷酸序列如SEQIDNo.2所示；所述检测垫上设置有检测线和质控线；所述检测线上喷涂有捕获探针与链霉亲和素的偶联物；所述捕获探针的3’端经生物素标记；所述捕获探针的核苷酸序列如SEQIDNo.3所示；所述质控线上喷涂有质控探针与链霉亲和素的偶联物；所述质控探针的3’端经生物素修饰；所述质控探针与检测探针的核苷酸序列互补配对；所述质控探针的核苷酸序列如SEQIDNo.4所示；所述金纳米棒的长度为60±15nm，宽度为28±5nm；所述金纳米棒的制备方法包括以下步骤：1）在十六烷基三甲基溴化铵水溶液中加入HAuCl4水溶液，在搅拌过程中加入NaBH4溶液，继续搅拌2min，得到金纳米种子溶液；2）将十六烷基三甲基溴化铵水溶液、HAuCl4水溶液、AgNO3水溶液、还原剂和所述金纳米种子溶液混合，进行还原反应，得到金纳米棒；所述检测探针与金纳米棒的偶联物的制备方法为：在金纳米棒中依次加入dATP、十二烷基硫酸钠水溶液、氯化钠水溶液和检测探针，进行偶联反应，离心，收集沉淀，洗涤，重悬，得到含有检测探针与金纳米棒的偶联物的溶液；所述重悬采用的试剂为洗脱缓冲液，所述洗脱缓冲液为以下质量份的组分：Na3PO4·12H2O304mg、牛血清蛋白2g、蔗糖4g、吐温-200.1g和水40g。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 安徽科技学院 一种用于检测DNA的免疫层析试纸条及其制备方法

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