申请/专利权人：华润现代中药(昆明)有限公司;云南中医药大学

申请日：2024-01-24

公开（公告）日：2024-04-30

公开（公告）号：CN117949589A

主分类号：G01N30/86

分类号：G01N30/86;G01N30/34

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.17#实质审查的生效;2024.04.30#公开

摘要：本发明公开了一种蜘蛛香药材指纹图谱的构建方法，本发明以乙腈‑0.1%甲酸溶液为流动相，以水为供试品溶剂，构建蜘蛛香药材指纹图谱同时测定新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸B、异绿原酸A、橙皮苷、异绿原酸C8种成分的含量。本发明方法蜘蛛香指纹图谱的构建方法通过优化提取时间、提取方法，使得蜘蛛香色谱峰的信息量最大程度暴露，检测灵敏度高（其中，异绿原酸B、异绿原酸A、橙皮苷、异绿原酸C分离效果明显优于现有技术），具有较强的专属性和良好的重现性及稳定性，准确度高，能快速高效的对蜘蛛香药材进行质量控制。本发明首次对蜘蛛香水提物中的隐绿原酸含量进行测定，进一步完善了对蜘蛛香中咖啡酰类衍生物的含量控制。

主权项：1.一种蜘蛛香药材指纹图谱的构建方法，其特征在于，按以下步骤实现：1）对照品溶液的制备：分别称取新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异绿原酸B、异绿原酸A、橙皮苷、异绿原酸C对照品适量，精密称定，加50%甲醇制成浓度分别为40-50µgml、500-600µgml、100-150µgml、15-25µgml、20-30µgml、40-50µgml、30-40µgml、35-45µgml的混合对照品溶液；2）供试品溶液的制备：取过3号筛的蜘蛛香药材粉末0.2-2g，置于具塞锥形瓶中，精密加入纯化水25-100ml，密塞，称重，80℃水浴浸泡30-90min后，超声提取30-90min，放置室温后用纯化水补足失重，经0.22µm微孔滤膜过滤，即得供试品溶液；3）将蜘蛛香药材供试品溶液和对照品溶液分别采用高效液相色谱法进行检测，构建蜘蛛香药材的指纹图谱；其中，色谱条件为：色谱柱为C18色谱柱，250mm×4.6mm,5μm；柱温为25-35℃；采用乙腈-0.1%甲酸溶液进行梯度洗脱：-30min，6%-13%乙腈，30-45min，13%-18%乙腈，45-55min，18%-23%乙腈，55--60min，23%-40%乙腈，60-70min，40%-60%乙腈；流速为1.0min；0~54min的检测波长为327nm，54~70min的检测波长为284nm；进样量为5-20µl。

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权利要求：

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