申请/专利权人：北京市农林科学院

申请日：2023-11-07

公开（公告）日：2024-04-30

公开（公告）号：CN117512032B

主分类号：C12P19/04

分类号：C12P19/04;C12P19/14;C08B37/06

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.04.30#授权;2024.02.27#实质审查的生效;2024.02.06#公开

摘要：本发明公开了一种低分子量HG型果胶的制备方法及其构象表征，包括以下步骤：步骤一、采用酸热提取结合分级醇沉法从果蔬加工副产物中提取果胶粗多糖；步骤二、将果胶粗多糖先采用复合糖苷酶进行一级定向酶解，得到一级酶解多糖，将一级酶解多糖采用内切果胶酶和果胶甲酯酶进行二级定向酶解，经纯化得到低分子量HG型果胶，所得果胶通过精细结构解析，利用多糖建模软件构建三维结构模型，表征构象。本发明利用水热法联合分级醇沉法提取果胶粗多糖，可在不破坏果胶分子结构的基础上获得分子量较小的果胶粗多糖，继而通过两步定向酶解有效破坏果胶分子结构，获得高纯度且均一的HG型果胶。

主权项：1.低分子量HG型果胶的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、采用酸热提取结合分级醇沉法从果蔬加工副产物中提取果胶粗多糖；步骤二、将果胶粗多糖先采用复合糖苷酶进行一级定向酶解，得到一级酶解多糖，将一级酶解多糖采用内切果胶酶和果胶甲酯酶进行二级定向酶解，经纯化得到低分子量HG型果胶；采用复合糖苷酶进行一级定向酶解的方法为：向果胶粗多糖中加入蒸馏水，配置成浓度为1-2.5%（wv）的果胶粗多糖溶液；将鼠李半乳糖醛酸水解酶、α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶、α-1→5-L-阿拉伯聚糖内切酶、β-D-半乳糖苷酶、β-1→4-D-半乳聚糖内切酶加入到果胶粗多糖溶液中酶解，酶解4-20h后使用无水乙醇进行沉淀，并使用凝胶色谱柱和阴离子交换柱纯化，得到一级酶解多糖，其中，鼠李半乳糖醛酸水解酶、α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶、α-1→5-L-阿拉伯聚糖内切酶、β-D-半乳糖苷酶、β-1→4-D-半乳聚糖内切酶在果胶粗多糖溶液中的终浓度均为0.5-1.5UmL；采用内切果胶酶和果胶甲酯酶进行二级定向酶解的方法为：将一级酶解多糖溶解于0.02-0.5molL乙酸钠缓冲溶液中，配置成浓度为1-2.5%（wv）的一级酶解多糖溶液；向一级酶解多糖溶液中加入内切多聚半乳糖醛酸酶和果胶甲基酯酶，置于50℃条件下酶解1-2h，得到二级酶解多糖，二级酶解多糖经真空浓缩除去75-85%的溶剂，冻干并研磨，得到低分子量HG型果胶，其中，内切多聚半乳糖醛酸酶、果胶甲基酯酶在一级酶解多糖溶液中的终浓度均为0.2-1.0UmL；一级酶解多糖在进行二级定向酶解前先进行预处理，预处理的方法为：将一级酶解多糖采用截流分子量10kDa的超滤膜进行分级，然后再置于离心机中以8000-10000r·min-1转速离心10-20min，回收超滤渗余物，进行二级定向酶解。

全文数据：

权利要求：

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