申请/专利权人：重庆医科大学

申请日：2024-02-04

公开（公告）日：2024-05-07

公开（公告）号：CN117982457A

主分类号：A61K9/51

分类号：A61K9/51;A61K47/46;A61K47/36;A61K47/22;A61K47/69;A61K38/50;A61K41/00;A61K33/44;A61K33/26;A61K31/352;A61P19/02;A61P19/06

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.24#实质审查的生效;2024.05.07#公开

摘要：本发明属于药物制剂领域。本发明涉及一种融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶淫羊藿素碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒及其制备方法。本发明制备得到的融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶淫羊藿素碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒粒径均匀，可以提高精氨酸脱亚胺酶抗肿瘤的效果。

主权项：1.一种融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶淫羊藿素碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒，其特征在于，包括精氨酸脱亚胺酶淫羊藿素碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒、红细胞膜和肺癌细胞膜的融合膜包裹层；所述的碳点普鲁士蓝纳米酶包括以下组分，其各组分质量比为： 所述的一种融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶淫羊藿素碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒中精氨酸脱亚胺酶含量为0.36-35.80UmL，内质网膜含量为0.1-1mgmL，淫羊藿素含量为2-20mgmL，碳点普鲁士蓝纳米酶含量为2-20mgmL，缓冲液1和缓冲液2在同一个配方中是同一种类型的缓冲液，浓度相等均为50-150mM，pH相同均为5.5-8.5，其余各组分质量比为： 所述的环糊精，包括羟丙基-α-环糊精、磺丁基-α-环糊精、甲基-β-环糊精、羟丙基-β-环糊精、羟丁基-β-环糊精、磺丁基-β-环糊精、羟丙基-γ-环糊精、磺丁基-γ-环糊精的一种或多种；所述的缓冲液1和缓冲液2，包括双2-羟基乙胺基三羟甲基甲烷-盐酸盐缓冲液、磷酸氢二钾-磷酸缓冲液、三羟甲基氨基甲烷-盐酸盐缓冲液的一种；所述的一种融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶淫羊藿素碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒的制备方法，包括下列步骤：1碳点普鲁士蓝纳米酶的制备方法：将处方量的铁氰化钾、聚乙烯吡咯烷酮和0.01M盐酸混合搅拌20-60分钟，70-90℃反应0.5-2小时；用超纯水洗涤3-5次，离心，收集沉淀，得到固体A；将处方量的柠檬酸、尿素和固体A加入超纯水中，加热5-15分钟，冷却后得到固体B；用超纯水洗涤固体B，离心，收集沉淀，得到碳点普鲁士蓝纳米酶；2透明质酸修饰的环糊精的制备方法：将处方量的透明质酸和1-乙基-3-[3-二甲胺基丙基]碳化二亚胺盐酸盐溶于无水甲酰胺1，2-6℃搅拌1-3小时，得到液体C；将环糊精溶于无水甲酰胺2后得到液体D；将液体D加入液体C中，2-6℃搅拌24-72小时，超纯水透析24-72小时，冷冻干燥，得到透明质酸修饰的环糊精；3内质网膜制备方法：收集组织，按照内质网富集试剂盒说明书方法提取，得到内质网膜；4精氨酸脱亚胺酶淫羊藿素碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒的制备方法：将处方量精氨酸脱亚胺酶和内质网膜溶解于缓冲液1中，超声15-45分钟，得到液体E；将处方量的淫羊藿素、卵磷脂、胆固醇和聚乙二醇1000维生素E琥珀酸酯溶解于二氯甲烷、三氯甲烷、无水乙醇、甲醇、乙醚中的一种或多种有机溶剂中，旋转蒸发形成均匀薄膜，加入液体E水化1-3小时，得到液体F；将步骤1得到的碳点普鲁士蓝纳米酶和步骤2得到的透明质酸修饰的环糊精溶解于缓冲液2中，超声20-60分钟后加到液体F中，搅拌，得到精氨酸脱亚胺酶淫羊藿素碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒；5红细胞膜的制备方法：取抗凝全血静置20-60分钟，离心，收集沉淀，用pH为7.4的10mM的等渗磷酸盐缓冲液洗涤3-5次，离心，收集沉淀；加入3倍体积的pH为7.4的2.5mM的低渗磷酸盐缓冲液，2-6℃静置6-24小时，离心，收集沉淀，得到红细胞膜；6肺癌细胞膜的制备方法：收集肺癌细胞，按照细胞膜蛋白与细胞浆蛋白提取试剂盒说明书方法提取细胞膜；超声20-60分钟，得到肺癌细胞膜；7融合膜的制备方法：取步骤5得到的红细胞膜和步骤6得到的肺癌细胞膜，按膜蛋白质量比1:3至3:1混合，超声20-60分钟，得到融合膜；8融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶淫羊藿素碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒的制备方法：将步骤4得到的精氨酸脱亚胺酶淫羊藿素碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒与步骤7得到的融合膜，以体积比1:3至3:1混匀，2-6℃振荡0.5-2小时，得到融合膜包裹的精氨酸脱亚胺酶淫羊藿素碳点普鲁士蓝纳米酶的纳米粒。

全文数据：

权利要求：

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