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申请/专利权人：南京鸿明生物科技有限公司;宜明(苏州)细胞生物科技有限公司
申请日：2024-04-03
公开（公告）日：2024-05-07
公开（公告）号：CN117987436A
主分类号：C12N15/66
分类号：C12N15/66;C12P19/34
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.05.24#实质审查的生效;2024.05.07#公开
摘要：本发明提供一种双链靶DNA序列的制备方法，首先，设计DNA质粒，质粒包含靶DNA序列和非靶DNA序列，靶DNA序列两端插入归位内切酶识别序列，非靶DNA序列的内部插入至少一个辅助内切酶识别序列；然后分别用归位内切酶和辅助内切酶切割质粒，得到靶DNA序列短片段和非靶DNA序列短片段的混合物；最后采用DNA水解酶水解混合物中的非靶DNA序列短片段，得到靶DNA序列。本申请提供的方法，可以有效酶切质粒，消化非靶基因序列片段并保留靶基因序列片段，最后经过纯化制备靶基因序列片段，能有效解决大规模制备靶基因序列片段的问题。
主权项：1.一种双链靶DNA序列的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：S1：设计DNA质粒模板，所述质粒模板包含靶DNA序列和非靶DNA序列，所述靶DNA序列两端插入归位内切酶识别序列，所述非靶DNA序列的内部插入至少一个辅助内切酶识别序列；S2：复制所述DNA质粒模板，得到DNA质粒，分别用所述归位内切酶和所述辅助内切酶切割所述DNA质粒，得到所述靶DNA序列和所述非靶DNA序列短片段的混合物；S3：采用DNA水解酶水解所述混合物中的所述非靶DNA序列短片段，得到所述靶DNA序列。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 南京鸿明生物科技有限公司;宜明(苏州)细胞生物科技有限公司 一种双链靶DNA序列的制备方法
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