申请/专利权人：上海源培生物科技股份有限公司

申请日：2022-10-28

公开（公告）日：2024-05-07

公开（公告）号：CN117987355A

主分类号：C12N5/077

分类号：C12N5/077

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.24#实质审查的生效;2024.05.07#公开

摘要：本发明涉及用于鸡胚成纤维细胞高密度培养的补料培养基及高密度培养鸡胚成纤维细胞的方法。所述补料培养基包括多种氨基酸、葡萄糖、无机盐等组分。所述方法包括在含有源培CEF无血清培养基H5E0KJ和微载体的生物反应器中批式培养鸡胚成纤维细胞；每日检测细胞培养介质中葡萄糖和乳酸的含量，当葡萄糖含量低于1.5gL时一次性补加5％上述补料培养基，当乳酸浓度达到6gL时用源培CEF无血清培养基H5E0KJ进行微载体沉降换液70％。本发明的补料培养基搭配CEF无血清培养基，通过特定的细胞培养方法，实现了鸡胚成纤维细胞的安全、高密度培养，细胞密度比单纯无血清培养基培养提高30倍，并大大降低了人造肉的生产成本。

主权项：1.一种用于鸡胚成纤维细胞高密度培养的补料培养基，其特征在于，所述补料培养基配合源培CEF无血清培养基H5E0KJ来使用，包括50mgL-200mgL的甘氨酸；45mgL-200mgL的丙氨酸；500mgL-1200mgL的精氨酸；300mgL-500mgL的天冬酰胺；100mgL-300mgL的天冬氨酸；50mgL-150mgL的半胱氨酸；200mgL-300mgL的胱氨酸；200mgL-300mgL的谷氨酸；300mgL-500mgL的组氨酸；400mgL-700mgL的异亮氨酸；500mgL-750mgL的亮氨酸；500mgL-800mgL的赖氨酸；450mgL-800mgL的甲硫氨酸；300mgL-450mgL的苯丙氨酸；600mgL-820mgL的脯氨酸；400mgL-650mgL的丝氨酸；600mgL-760mgL的苏氨酸；480mgL-600mgL的色氨酸；200mgL-350mgL的酪氨酸；380mgL-600mgL的缬氨酸；60000mgL-80000mgL的葡萄糖；0.2mgL-0.5mgL的生物素；25mgL-50mgL的氯化胆碱；1mgL-3mgL的泛酸钙；2mgL-4mgL的叶酸；0.5mgL-1mgL的核黄素；0.5mgL-1.2mgL的VB12；6mgL-10mgL的肌醇；3mgL-4mgL的盐酸吡哆醇；4.2mgL-5mgL的盐酸吡哆醛；2.2mgL-3.5mgL的烟酰胺；100mgL-200mgL的氯化钙；40mgL-80mgL的硫酸镁；300mgL-400mgL的氯化钾；2000mgL-3000mgL的碳酸氢钠；350mgL-500mgL的氯化钠；800mgL-1200mgL的谷氨酰胺和余量的水。

全文数据：

权利要求：

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