申请/专利权人：中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所

申请日：2021-11-01

公开（公告）日：2024-05-07

公开（公告）号：CN114002200B

主分类号：G01N21/64

分类号：G01N21/64;C09K11/02

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.07#授权;2022.02.22#实质审查的生效;2022.02.01#公开

摘要：本发明公开了一种近红外二区激活型探针及其应用。所述近红外二区激活型探针包括检测体系和放大体系，该检测体系由第一链探针、第二链探针、第三链探针组成，该放大体系由待检测的目标序列与第二链探针、第三链探针以及第四链探针组成；第二链探针与第三链探针完全互补，第一链探针和第四链探针与第三链探针部分序列互补；且第三链探针中部分序列与待检测的目标序列完全互补，第一链和第四链中有一部分序列与待检测的目标序列部分相同。本发明将toe‑hold链置换反应与近红外二区荧光相结合，构建的近红外二区激活型探针可以在活体水平上对乳腺癌前哨淋巴结转移进行高灵敏度、高特异性、快速检测，对乳腺癌转移的早期诊断具有重要意义。

主权项：1.一种近红外二区激活型探针，其特征在于包括检测体系和放大体系，所述检测体系由第一链探针、第二链探针、第三链探针组成，所述放大体系由待检测的目标序列与第二链探针、第三链探针以及第四链探针组成；其中，所述第一链探针包括1*序列和2*序列，且2*序列的5’端连接有荧光供体，1*序列为TTAATGCTAATCGTGAT，2*序列为CCTA；所述第二链探针包括3*序列，且3*序列的3’端连接有荧光受体，3*序列为TCTCACTAACTTACGG；所述第三链探针包括1序列、2序列、3序列、4序列和5序列，1序列为ATCACGATTAGCATTAA，2序列为TAGG，3序列为CCGTAAGTTAGTGAGA，4序列为TC，5序列为AACCCCT；所述第四链探针包括1**序列、2**序列、3**序列和4**序列，1**序列为TTAATGCTAATCGTGAT，2**序列为CCTA，3**序列为TAACTTACGG，4**序列为TC；第二链探针与第三链探针完全互补，第一链探针和第四链探针与第三链探针部分序列互补；所述第三链探针中1序列与待检测的目标序列互补，1*序列和1**序列与1序列部分互补，2*序列和2**序列与2序列完全互补，3*序列和3**序列与3序列完全互补，4**序列与4序列不互补，2序列和5序列为toe-hold链置换的结合位点；并且，所述第一链探针、第二链探针、第三链探针能够在退火条件下进行配对，形成三元复合物，从而使荧光受体将荧光供体的荧光信号淬灭；在待检测的目标序列、第二链探针与第三链探针形成的复合物中，第四链探针能够与待检测的目标序列竞争性结合第三链探针，使待检测的目标序列游离，游离出来的目标序列继续与第一链探针竞争性结合第三链探针，使第一链探针游离，荧光供体远离荧光受体并发射荧光信号；上述第一链探针、第二链探针、第三链探针、第四链探针用于miRNA检测，针对不同的被检测miRNA序列，调整第三链的1序列，和与其互补的1*序列和1**序列。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国科学院苏州纳米技术与纳米仿生研究所 近红外二区激活型探针及其应用

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