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申请/专利权人:国家烟草质量监督检验中心
摘要:一种检测尼古丁的试纸条及其应用,该试纸条构成依次包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板。所述结合物释放垫上喷涂有胶体金标记的尼古丁特异性抗体。尼古丁特异性抗体是以尼古丁‑半抗原载体蛋白偶联物作为免疫原获得。尼古丁半抗原是从8种尼古丁半抗原中优选而来,筛选原则以分子刚性结构和免疫学经验为依据,对比了尼古丁5号位上不同取代基团的半抗原结构,优选氨基半抗原‑5。本发明以胶体金标记抗体,采用免疫层析技术,实现对样本中的尼古丁快速免疫分析。本发明还提供一种应用上述试纸条同时检测样品中尼古丁的方法。本发明的优点是灵敏度高、检测快速、操作方便,经济实用,能够实现对大批量的样品进行快速检测和现场检测。
主权项:1.一种检测尼古丁的试纸条,包括样品吸收垫、结合物释放垫、反应膜、吸水垫和底板;其特征在于:结合物释放垫上喷涂胶体金标记的尼古丁特异性抗体,反应膜上固定有检测线与质控线,检测线包被有尼古丁半抗原-载体蛋白偶联物,质控线包被有山羊抗小鼠二抗,尼古丁特异性抗体是以尼古丁半抗原与载体蛋白偶联物作为免疫原获得,所述尼古丁半抗原的制备方法如下:是由尼古丁和联硼酸频那醇酯在甲氧基环辛二烯合铱二聚体催化下进行硼化反应,制备5-四烷氧乙硼基-尼古丁化合物3,引入双氧水制备5-羟基-尼古丁化合物4,在化合物4上引入叔丁基2-溴乙基氨基甲酸酯,最后加入三氟乙酸Trifluoroaceticacid,TFA和二氯甲烷Dichloromethane,DCM制备尼古丁半抗原5-氨基-乙氧基-尼古丁氨基半抗原-5,其分子结构式为:
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