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【发明公布】一种基于PrGO-Hemin-Pd NPs构建检测GPC3的夹心型适配体传感器_桂林电子科技大学_202410169438.6 

申请/专利权人:桂林电子科技大学

申请日:2024-02-06

公开(公告)日:2024-05-10

公开(公告)号:CN118010825A

主分类号:G01N27/327

分类号:G01N27/327;G01N27/48

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.05.28#实质审查的生效;2024.05.10#公开

摘要:一种基于磷掺杂还原性氧化石墨烯‑氯化血红素‑钯纳米复合材料构建检测GPC3的电化学夹心型适配体传感器,以具有大比表面积,高电导率和良好原位电化学活性的的PrGO‑Hemin‑Pd为载体,与GPC3Apt偶联形成信号探针,采用构造夹心型结构的方式形成GPC3Apt‑GPC3‑cGPC3Apt稳定的空间结构,通过DPV法记录PrGO‑Hemin‑Pd中Hemin的氧化还原峰值电流变化,从而实现对GPC3的检测。该方法成本低、选择性好,灵敏度高,最低检测限为0.001ngmL。

主权项:1.一种基于磷掺杂还原性氧化石墨烯-氯化血红素-钯纳米复合材料PrGO-Hemin-PdNPs构建检测GPC3的电化学夹心型适配体传感器,按以下步骤进行:步骤1:磷掺杂还原性氧化石墨烯-氯化血红素-钯-GPC3适配体PrGO-Hemin-Pd-GPC3Apt信号探针的制备1磷掺杂还原性氧化石墨烯PrGO的制备:将氧化石墨烯GO溶于水中,超声破碎得到氧化石墨烯GO溶液,将GO溶液与一水合次亚磷酸钠NaH2PO2·H2O混合均匀,进行水热反应,冷却,并将产生的沉淀离心、洗涤,得到PrGO;2磷掺杂还原性氧化石墨烯-氯化血红素PrGO-Hemin的制备:将氯化血红素Hemin溶于超纯水和氨水NH3·H2O中,得Hemin溶液;然后将PrGO溶液和Hemin溶液混合;在混合溶液中加入水合肼,水浴反应得到PrGO-Hemin纳米材料;3磷掺杂还原氧化石墨烯-氯化血红素-钯纳米复合材料PrGO-Hemin-PdNPs的制备:取上述得到的PrGO-Hemin溶液加入次氯钯酸钠Na2PdCl4和水合肼,离心、洗涤,得到PrGO-Hemin-PdNPs;4磷掺杂还原氧化石墨烯-氯化血红素-钯-GPC3适配体PrGO-Hemin-Pd-GPC3Apt信号探针的制备:将GPC3适配体GPC3Apt溶液和PrGO-Hemin-Pd溶液混合,加入牛血清蛋白BSA溶液,孵育、离心、清洗,得PrGO-Hemin-Pd-GPC3Apt信号探针;步骤2:电极的修饰与生物传感界面的构建1金@聚邻苯二胺纳米颗粒丝网印刷电极Au@POPDNPsSPE的制备:裸电极SPE置于稀硫酸H2SO4中活化,活化后的SPE置于金@聚邻苯二胺Au@POPD溶液中进行电沉积,沉积电位为0.4V,沉积时间为120s,得Au@POPDNPsSPE;2GPC3适配体纳米金@聚邻苯二胺丝网印刷电极GPC3AptAu@POPDNPsSPE的制备:将GPC3适配体GPC3Apt滴在Au@POPDNPsSPE界面上,孵育,清洗、干燥;随后在传感界面滴加牛血清白蛋白BSA溶液,干燥,得到GPC3AptAu@POPDNPSSPE;3磷掺杂还原氧化石墨烯-氯化血红素-钯PrGO-Hemin-Pd-GPC3Apt信号探针的制备:将PrGO-Hemin-Pd纳米复合材料与GPC3Apt震荡混匀,孵育,加入BSA溶液,孵育,离心、除去上清液;重新分散在超纯水中,得到PrGO-Hemin-Pd-GPC3Apt信号探针;4磷掺杂还原氧化石墨烯-氯化血红素-钯-GPC3适配体GPC3适配体纳米金@聚邻苯二胺丝网印刷电极PrGO-Hemin-Pd-GPC3AptGPC3AptAu@POPDNPsSPE传感界面的制备:向GPC3AptAu@POPDNPsSPE上滴加PrGO-Hemin-Pd-GPC3Apt,孵育、清洗、干燥,得PrGO-Hemin-Pd-GPC3AptGPC3AptAu@POPDNPsSPE;步骤3:GPC3的工作曲线绘制1将标准GPC3溶液滴加到步骤2得到的电化学适配体传感器中,孵育、清洗、干燥,得到PrGO-Hemin-Pd-GPC3AptGPC3GPC3AptAu@POPDNPsSPE工作电极;2将工作电极放入磷酸缓冲盐溶液PBS中,采用电化学工作站的差分脉冲伏安法DPV扫描,记录其峰电流;3分别对不同浓度的GPC3进行检测,记录峰值电流;根据传感器的电流响应值与GPC3浓度的关系,绘制工作曲线,计算出该方法的最低检测限;步骤4:实际血清样本中GPC3的检测1在步骤2得到的电化学适配体传感器上,滴加待测实际血清样本,孵育、清洗、干燥、得到工作电极;2将工作电极放入PBs溶液中,采用电化学工作站的DPV扫描,记录其峰电流;3根据步骤3所述的工作曲线,得到所述待测实际样本中GPC3的浓度。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 桂林电子科技大学 一种基于PrGO-Hemin-Pd NPs构建检测GPC3的夹心型适配体传感器

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