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申请/专利权人：广西大学
申请日：2024-01-23
公开（公告）日：2024-05-10
公开（公告）号：CN118006691A
专利技术分类：......杆状病毒载体[2006.01]
专利摘要：本发明公开了一种禽传染性支气管炎病毒多表位嵌合病毒样颗粒疫苗及制备方法与应用，涉及疫苗技术领域。将表位多肽Pep‑EB表位、Pep‑ETh表位和Pep‑ECTL表位以多表位与IBV广西优势基因型LX4型和优势血清型血清Ⅰ型代表性毒株GX‑YL5的S1基因、S2基因的跨膜区和胞质尾区TMCT以柔性肽串联，并化学合成基因片段rS‑EB‑Th‑CTL，如SEQIDNO:4所示；本发明巧妙利用柔性肽、S2蛋白的跨膜区和胞质尾区蛋白的作用及VLPs良好的抗原展示效果，将多个表位通过串联更加立体，高密度的表达嵌合在VLPs表面，免疫原性更强，更加稳定。
专利权项：1.一种禽传染性支气管炎病毒多表位嵌合病毒样颗粒疫苗，其特征在于，制备方法包括以下步骤：将表位多肽Pep-EB表位、Pep-ETh表位和Pep-ECTL表位以多表位与IBV广西优势基因型LX4型和优势血清型血清Ⅰ型代表性毒株GX-YL5的S1基因、S2基因的跨膜区和胞质尾区TMCT以柔性肽串联，并化学合成基因片段rS-EB-Th-CTL，如SEQIDNO:4所示；通过同源重组技术克隆到pFastBacTMHBM-TOPO重组转座载体，构建了pFastBacTMHBM-TOPO-rS-EB-Th-CTL载体，转化DH10Bac大肠杆菌感受态细胞，获得rHBM-rS-EB-Th-CTL重组杆粒；将重组杆粒转染Sf9昆虫细胞，利用IFA、Westernblot鉴定表达的重组蛋白；上述构建并获得的分别表达IBVGX-YL5株重组S蛋白、M蛋白和E蛋白的重组杆状病毒rHBM-rS-EB-Th-CTL、rHBM-M和rHBM-E共感染Sf9细胞制备多表位嵌合VLPsrS-EB-Th-CTLME-VLPs，纯化后进行Westernblot、透射电镜和免疫电镜鉴定，成功制备IBV多表位嵌合VLPs即rS-EB-Th-CTLME-VLPs。
百度查询： 广西大学 一种禽传染性支气管炎病毒多表位嵌合病毒样颗粒疫苗及制备方法与应用
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