申请/专利权人:艾特生物科技(深圳)有限公司
申请日:2024-04-09
公开(公告)日:2024-05-10
公开(公告)号:CN118006733A
主分类号:C12Q1/6816
分类号:C12Q1/6816;C12Q1/70;C12N15/115;C12N15/113;G01N21/76;C12R1/93
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.05.28#实质审查的生效;2024.05.10#公开
摘要:本发明涉及核酸检测技术领域,提供了一种基于Cas12a与链霉亲和素适配体级联的核酸化学发光检测方法,包括:S1、制备链霉亲和素适配体修饰的磁珠和生物素偶联碱性磷酸酶;S2、将核酸样品和链霉亲和素适配体修饰的磁珠加入Cas12a反应体系形成第一混合溶液,并对第一混合溶液进行磁分离清洗;S3、提供链霉亲和素,将链霉亲和素和生物素偶联碱性磷酸酶加入至磁分离清洗后的第一混合溶液中形成第二混合溶液,并对第二混合溶液进行磁分离清洗;S4、将化学发光底物加入至磁分离清洗后的第二混合溶液中形成第三混合溶液,对第三混合溶液孵育后进行化学发光信号检测,即可获取核酸样品的信息。本发明的核酸化学发光检测方法,其灵敏度高、检测速度快。
主权项:1.一种基于Cas12a与链霉亲和素适配体级联的核酸化学发光检测方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:S1、制备链霉亲和素适配体修饰的磁珠和生物素偶联碱性磷酸酶;S2、提供核酸样品,并将所述核酸样品和所述链霉亲和素适配体修饰的磁珠加入Cas12a反应体系形成第一混合溶液,并对所述第一混合溶液进行磁分离清洗;所述Cas12a反应体系用于识别并切割所述核酸样品和所述链霉亲和素适配体修饰的磁珠;所述Cas12a反应体系包括具有非特异性单链DNA反式切割活性的Cas12a切口酶、crRNA以及RNase抑制剂,所述crRNA用于激活所述Cas12a切口酶的非特异性单链DNA反式切割活性;S3、提供链霉亲和素,将所述链霉亲和素和所述生物素偶联碱性磷酸酶加入至磁分离清洗后的所述第一混合溶液中形成第二混合溶液,并对所述第二混合溶液进行磁分离清洗;S4、提供化学发光底物,并将所述化学发光底物加入至磁分离清洗后的所述第二混合溶液中形成第三混合溶液,对所述第三混合溶液孵育后进行化学发光信号检测,即可获取所述核酸样品的信息。
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权利要求:
百度查询: 艾特生物科技(深圳)有限公司 一种基于Cas12a与链霉亲和素适配体级联的核酸化学发光检测方法
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