申请/专利权人:石河子大学
申请日:2024-01-15
公开(公告)日:2024-05-10
公开(公告)号:CN118006745A
主分类号:C12Q1/6869
分类号:C12Q1/6869;C12Q1/6888;C12Q1/6806;C40B50/06;G16B20/30;G16B30/10
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.05.28#实质审查的生效;2024.05.10#公开
摘要:本发明涉及基因检测技术领域,公开了基于DNA甲基化高通量测序的奶牛早期妊娠的检测方法,包括S1、实验动物选取;S2、样本采集;S3、RNA和DNA的提取及纯度测定;S4、RNA测序;S5、RRBS甲基化测序;S6、富集分析。本发明以早孕相关基因DNA甲基化作为早孕指示因子,可真正做到早孕检测;核酸检测技术灵敏快捷,适合对集约化养殖奶牛进行早早孕检测;DNA检测具有较大优势,其分子性质相对稳定易于运输保存;检测技术更为简单,成本更低等。
主权项:1.基于DNA甲基化高通量测序的奶牛早期妊娠的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、实验动物选取:选取妊娠30天的3头奶牛作为实验组和未妊娠的3头奶牛作为对照组,两组奶牛的个体、毛色、年龄相近;S2、样本采集:采集实验组和对照组奶牛的外周血液后,立即冷冻保存;S3、RNA和DNA的提取及纯度测定,纯度测定完成后分析DNA降解程度以及RNA或蛋白质污染程度;S4、RNA测序:使用高质量的RNA构建文库,文库构建完成后,把不同文库按照有效浓度及目标下机数据量的需求进行组装;通过高通量测序仪测量测序片段,得到图像数据,通过CASAVA碱基识别转化图像数据得到序列数据,使用hisat2软件将有效数据与参考基因组进行比对;最后利用DESeq2软件对各组样品进行差异基因的分析;S5、RRBS甲基化测序;S6、富集分析:使用R包clusterProfile的方法对GO功能和KEGG通路的富集分析,得到差异基因功能富集的情况,当P值小于0.05时,认为GO或者是KEGG功能有显著的富集情况。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 石河子大学 基于DNA甲基化高通量测序的奶牛早期妊娠的检测方法
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