申请/专利权人：天水市果树研究所

申请日：2024-03-12

公开（公告）日：2024-05-10

公开（公告）号：CN118000096A

主分类号：A01H4/00

分类号：A01H4/00;A01G17/00;A01G2/10;A01G24/15;A01G24/20

优先权：

专利状态码：在审-公开

法律状态：2024.05.10#公开

摘要：本发明提供了一种抗涝、抗盐碱大樱桃砧木苗的组培脱毒快繁方法，包括初代培养、扩繁继代、脱毒和扦插生根四个步骤。本发明采用改良F14培养基，使新芽萌发快，几乎不停长，叶片嫩绿，扩繁效果好，且大樱桃砧木苗一致性较高，长势良好，可以在短期内可以获得大量脱毒试管苗，经嫁接后供应市场，能有效解决河滩地、盐碱地栽植大樱桃的需求。

主权项：1.一种抗涝、抗盐碱大樱桃砧木苗的组培脱毒快繁方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、初代培养11月份，2-5年生大樱桃砧木兰丁2号自然落叶后剪取一年生枝条，流水进行表面清洗后，在温度为22℃，光照为2000-2400LX的条件下进行水培培养，待新芽长到2cm，采集顶芽和下面的第一侧芽的带芽茎段，将带芽茎段在体积浓度为1‰的84消毒液中浸泡5-10min后在流水下冲洗2-6min，然后放入洗洁精稀释液中清洗10-15min，然后放入脱脂纱布中流水冲洗1-2h，用体积浓度为75％的酒精中浸泡10-25ms后用无菌水冲洗2-3次，然后在体积浓度为0.1％的升汞溶液中处理1.5-3min，处理完成后移到无菌水中冲洗4-6次，然后切0.4-0.5cm带芽茎段，用无菌滤纸吸干水分，转接到装有初代培养培养基的培养瓶中，每瓶接2个带芽茎段，培养温度为21-23℃，湿度为60-70％，先暗培养7-10天，再在光照为2000-2400LX的条件下培养15-20天，得到无菌系瓶苗；所述初代培养培养基配方为改良F14培养基、0.2-0.6mgL6-苄基腺嘌呤、0.02-0.1mgL吲哚丁酸、10-20gL活性炭、20gL白砂糖和5gL琼脂，pH为5.6；所述改良F14培养基由大量元素、微量元素和有机物组成，大量元素为硝酸铵480mgL、硝酸钾220mgL、七水硫酸镁360mgL、磷酸二氢钾240mgL、四水硝酸钙1000mgL；微量元素为硫酸锰0.67mgL、七水硫酸锌0.86mgL、二水钼酸钠0.25mgL、硼酸12.4mgL、碘化钾0.08mgL、五水硫酸铜0.025mgL、六水氯化钻0.025mgL、EDTA-Na227.8mgL、七水硫酸铁37.3mgL；有机物为甘氨酸2mgL、盐酸吡多醇1mgL、烟酸1mgL、盐酸硫胺素0.8mgL、肌醇100mgL；S2、扩繁继代将S1中初代培养成活的无菌系瓶苗进行扩繁，选取生长健壮、整体度一致的芽转接到扩繁培养基中，每瓶接4个芽，移入培养室，培养温度为21-23℃，湿度为60％-70％，先暗培养7-10天，再在光照为2000-2400LX的条件下培养20-35天，得到丛生芽无菌系材料；所述扩繁培养基配方为改良F14培养基、0.60mgL6-苄基腺嘌呤、0.06-0.12mgL萘乙酸，0.06-0.12mgL赤霉素，20gL白砂糖和5gL琼脂，pH为5.6；S3、脱毒将S2扩繁继代培养的丛生芽无菌系材料，剪取新芽0.4-0.6cm进行二次扩繁继代转接，转接到S2所述的扩繁培养基，每瓶接4株，具体为：先在22-25℃条件下培养15-20天，然后转移到人工气候箱中后分别给予每天光照培养14h、暗培养10h，前10-15天人工气候箱暗培养从26℃开始，每天温度升高1℃，升温至32℃后不再升温，保持32℃不变，光照培养从26℃开始，每天温度升高1℃，升温至36-38℃后温度保持不变，后20天人工气候箱光照培养在35-38℃进行，暗培养在32℃的温度下进行，培养完成后从材料嫩梢上剥取0.4-0.5mm茎尖进行转接培养14-21天，然后进行第二次剥茎尖，剥取0.4-0.5mm茎尖培养35-45天时，剪取2.0-4.0cm的芽，进行病毒检测，获得脱毒试管苗按照S2的方法做脱毒试管苗的扩繁继代；S4、扦插生根S401、将扩繁35-45天的脱毒试管苗扩繁材料切去基部愈伤组织，剪取长2.0-3.0cm的单株茎段，摘去基部2-5片小叶，装入容器中喷水封口备用；S402、准备营养钵，放入基质，加入生根营养液；S403、把剪好的试管苗按2×2cm间距插入营养钵内基质中，基质湿度为60-80％，插满后用白色塑料薄膜覆盖整盘营养钵，进行生根培养；S404、培养15-20天后，观察生根情况，当小苗基部生出丛状根时，揭去塑料膜，将营养钵移至地面遮荫培养，湿度保持在85％以上；S405、培养40-60天后，将小苗单株移入蛭石和腐熟有机肥中，按时浇透水，使苗木逐渐适应露地生长环境，等小苗长到5-10cm时，带土移入大田，参照大田育苗方法管理。

全文数据：

权利要求：

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