申请/专利权人：成都翼泰生物科技有限公司

申请日：2022-02-21

公开（公告）日：2024-05-10

公开（公告）号：CN114544831B

主分类号：G01N30/06

分类号：G01N30/06;G01N30/14;G01N30/02;G01N30/72

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.10#授权;2023.05.23#专利申请权的转移;2022.06.14#实质审查的生效;2022.05.27#公开

摘要：本发明属于生物化学分析技术领域，具体涉及一种分离血液中游离甲状腺激素的方法及其应用。所述方法包括以下步骤：1活化SPE凝胶小柱；2取血清样本上样孵育；3洗脱分离；所述SPE凝胶小柱的填料主要是GPCSEC为核心。该方法采用凝胶过滤，将结合态和游离态甲状腺激素快速、有效分开，解决了分离过程中的结合态释放问题，保证游离甲状腺激素检测结果的准确性，与平衡透析ED和超滤UF相比，操作简便，时间短、效率高，便于临床推广和应用。

主权项：1.分离血液中游离甲状腺激素T3、游离甲状腺激T4或游离甲状腺激rT3中一种或多种的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：1将游离甲状腺激素从血液中分离出来得游离甲状腺激素；2然后使用高效液相色谱将游离甲状腺激素T3、游离甲状腺激T4或游离甲状腺激rT3中一种或多种从所述离甲状腺激素进行分离；步骤1中，分离血液中游离甲状腺激素的方法包括以下步骤：a活化SPE凝胶，SPE凝胶为SEC-120；b取血清样本上样孵育；c洗脱分离；步骤2中，所述高效液相色谱以苯基为填料的色谱柱，以流动相A和流动相B为流动相进行梯度洗脱；所述流动相A为体积分数0.1-0.2％的甲酸水溶液，流动相B相为甲醇或乙腈的一种或多种混合；所述梯度洗脱的程序为：0min，设置所述流动相A与所述流动相B的体积比为60:40，0.5min，设置所述流动相A与所述流动相B的体积比为60:40，4min，设置所述流动相A与所述流动相B的体积比为2:98，5min，设置所述流动相A与所述流动相B的体积比为2:98，5.01min，设置所述流动相A与所述流动相B的体积比为60:40，6min，设置所述流动相A与所述流动相B的体积比为60:40；SPE凝胶小柱的填料量选择5-60mg；步骤c中，所述洗脱分离包括：先使用洗脱液A进行冲洗，然后再使用洗脱液B进行冲洗，所述洗脱液A选自Tris-Hcl缓冲液、PB缓冲液中一种或多种混合，所述洗脱液B选自甲醇、质量分数0.1-0.2％氨水-甲醇、乙腈中的一种或多种混合。

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权利要求：

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