申请/专利权人:邦泰生物工程(深圳)有限公司
申请日:2024-04-16
公开(公告)日:2024-05-17
公开(公告)号:CN118048332A
主分类号:C12N9/04
分类号:C12N9/04;C12N1/21;C12P19/30;C12R1/19
优先权:
专利状态码:在审-实质审查的生效
法律状态:2024.06.04#实质审查的生效;2024.05.17#公开
摘要:本发明提出一种高催化性能葡萄糖脱氢酶突变体和一种还原型β‑烟酰胺单核苷酸的制备方法。对葡萄糖脱氢酶的定点突变为R41QV73AA98KI195R。将突变体质粒转移至大肠杆菌获得重组工程菌E.coliBL21DE3‑BcGDH(R41QV73AA98KI195R),重组工程菌通过发酵进行蛋白表达,获得含有目标蛋白的重组工程菌全细胞,利用重组工程菌全细胞悬浮液或对应全细胞量破碎所得粗酶液催化将β‑烟酰胺单核苷酸转化成还原型β‑烟酰胺单核苷酸。优化催化工艺,最佳反应工艺为:10gL全细胞悬浮液、400mMβ‑烟酰胺单核苷酸、480mM葡萄糖、100mM甘氨酸氢氧化钠,反应温度为30℃,pH值为9.0±0.5,实现了2h内β‑烟酰胺单核苷酸转化率达到100%的高效催化。
主权项:1.一种高催化性能葡萄糖脱氢酶突变体,其特征在于,所述突变体的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示,与如SEQIDNO.1所示葡萄糖脱氢酶亲本的氨基酸序列相比,所述突变体的突变为R41QV73AA98KI195R。
全文数据:
权利要求:
百度查询: 邦泰生物工程(深圳)有限公司 一种高催化性能葡萄糖脱氢酶突变体及在NMNH合成中的应用
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