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申请/专利权人：上海浦东复旦大学张江科技研究院;复旦大学
申请日：2024-01-18
公开（公告）日：2024-05-17
公开（公告）号：CN118048697A
主分类号：C40B40/08
分类号：C40B40/08;C40B50/06;C12Q1/6806;C12Q1/6869;C12N15/11
优先权：["20230626 CN 2023107591868"]
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.04#实质审查的生效;2024.05.17#公开
摘要：本申请提供了一种单细胞基因组测序文库的构建方法及试剂盒。该方法包括步骤S1制备单细胞样本的基因组DNA；步骤S2将基因组DNA置于片段化反应体系中，获得具有细胞标签和文库扩增接头序列的片段化DNA，基因组DNA片段化反应体系中包括含有细胞标签和文库扩增接头序列的Tn5转座酶；步骤S3将不同单细胞来源的片段化后的基因组DNA混合；步骤S4将混合后的DNA使用测序文库接头引物同步完成DNA量的扩增和测序文库的构建。本申请通过使用Tn5转座酶，使极微量的单细胞基因组DNA在随机被切断的同时末端被引入文库扩增接头序列，以细胞标签区分不同单细胞，以测序文库接头作为引物扩增片段化后的DNA片段，同步实现多个单细胞基因组的扩增和文库的构建。
主权项：1.一种单细胞基因组测序文库的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤S1制备单细胞样本的基因组DNA；步骤S2基因组DNA片段化：将所述基因组DNA置于包括Tn5转座酶的基因组DNA片段化反应体系中，获得具有细胞标签和文库扩增接头序列的片段化基因组DNA，所述Tn5转座酶携带有细胞标签和文库扩增接头序列；步骤S3将不同单细胞来源的所述片段化基因组DNA混合；步骤S4将所述混合后的片段化DNA使用测序文库接头引物进行PCR扩增，同步完成所述基因组DNA的扩增和测序文库的构建。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 上海浦东复旦大学张江科技研究院;复旦大学 一种单细胞基因组测序文库的构建方法及试剂盒
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