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申请/专利权人：上海近观科技有限责任公司
申请日：2024-03-11
公开（公告）日：2024-05-17
公开（公告）号：CN118048340A
主分类号：C12N9/12
分类号：C12N9/12;C12N15/54;C12Q1/6844;C12Q1/6869
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.04#实质审查的生效;2024.05.17#公开
摘要：本发明涉及基因工程领域，特别是涉及一种DNA聚合酶及其用途。本发明中DNA聚合酶包含野生型Phi29DNA聚合酶片段在第65位、第165位或第567位中任一位置或多个位置进行一种或多种氨基酸突变所形成的多肽片段；所述野生型Phi29DNA聚合酶片段的氨基酸序列如SEQIDNo.7所示。本发明通过分析野生型Phi29DNA聚合酶的结构与功能区域，针对现有的Phi29DNA聚合酶构建了大量的点突变，制备出一系列带有点突变位点的重组Phi29DNA聚合酶，并对其进行了包括3’‑5’核酸外切酶活性、保真性、聚合酶活性和链置换活性在内的测试分析，从中获得了3’‑5’核酸外切酶活性明显降低，且不影响其保真性，同时提高了聚合酶活性与链置换活性的突变体。根据本发明制备的DNA聚合酶，在应用于DNA扩增和测序时，可以在降低错误率的同时提高反应效率，从而实现准确高效的DNA聚合。
主权项：1.一种DNA聚合酶，其特征在于，所述DNA聚合酶包含如下特征中一种或多种：1所述DNA聚合酶包含野生型Phi29DNA聚合酶片段在第65位、第165位或第567位中任一位置或多个位置进行一种或多种氨基酸突变所形成的多肽片段；所述野生型Phi29DNA聚合酶片段的氨基酸序列如SEQIDNo.7所示；2与SEQIDNo.7具有90％及以上的序列一致性，以及具有1限定的所述DNA聚合酶的功能的多肽片段。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 上海近观科技有限责任公司 一种DNA聚合酶及其用途
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