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申请/专利权人：天津大学
申请日：2024-01-29
公开（公告）日：2024-05-17
公开（公告）号：CN118048308A
主分类号：C12N5/079
分类号：C12N5/079;C12N5/0735
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.04#实质审查的生效;2024.05.17#公开
摘要：本发明公开了一种基于H9诱导产生含有视泡的类脑器官及其眼脑融合培养方法。本发明利用H9胚胎干细胞诱导产生一种具有原始视野的含有视泡的类脑器官，基于已建立的视泡类脑器官培养体系，利用显微成像与早期视网膜发育和感光细胞发育成熟相关特异性标志物抗体结合，对含有视泡的类脑器官结果和功能性鉴定。
主权项：1.一种基于H9诱导产生含有视泡的类脑器官的眼脑融合培养方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，将H9胚胎干细胞进行培养，分化成三维的含有视泡的类脑器官，包括以下步骤：将H9胚胎干细胞在mTeSR1培养基中培养，直至细胞融合度达到70％，制备单细胞悬液，加入含有10mMY27632的神经诱导培养基，接种于孔板内，每天用不含有10mMY27632的神经诱导培养基半量换液，培养0～5天，形成神经球，加入神经球培养基，静置培养，每天用神经球培养基半量换液，培养至第6～第7天，第8天加入前期视泡类脑器官培养基，第10天加入成熟期视泡类脑器官培养基旋转培养，每周用成熟期视泡类脑器官培养基半量换液，直至分化成三维的含有视泡的类脑器官；步骤2，对步骤1所述的类脑器官继续培养至其发展出强烈的着色区域，对前脑模式和视野规范标记的类脑器官进行免疫染色和成像，验证类脑器官结构功能和神经发育情况。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 天津大学 基于H9诱导产生含有视泡的类脑器官及眼脑融合培养方法
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