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申请/专利权人：北京悦康科创医药科技股份有限公司
申请日：2024-02-01
公开（公告）日：2024-05-17
公开（公告）号：CN118048418A
主分类号：C12P19/34
分类号：C12P19/34;C12N15/10
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.04#实质审查的生效;2024.05.17#公开
摘要：本公开涉及一种自复制mRNA原液工业化生产及分离纯化方法及其应用。所述方法①通过对自复制RNA共转录体系IVT反应体系，通过优化缓冲盐离子的类型和浓度以及组合其他盐类型，提高自复制RNA原液产量及完整性；②通过对mRNA采用不同的纯化工艺以及纯化工艺组合入手；并对③对亲和层析中缓冲液体系中还原剂的添加种类、用量，以及优化柱层析的上样缓冲液盐离子成分及洗杂比例来提高工业生产的产能和完整性，并且降低saRNA原液中的杂质和副产物。
主权项：1.一种自复制mRNA原液工业化生产及分离纯化方法，包括如下步骤：1以线性化质粒为模板，加入核苷单体、帽子类似物和RNA聚合酶，通过共转录加帽反应合成mRNA，去除模板后，得到自复制mRNA混合液；2通过以下任一种方式获得自复制mRNA原液：i将步骤1中获得的自复制mRNA反应混合液进行纯化，获得自复制mRNA原液；ii将步骤1中获得的自复制mRNA反应混合液与酶混合，进行降解反应，获得mRNA原液；iii将步骤1中获得的自复制mRNA反应混合液与酶混合，进行降解反应，然后再进行纯化，获得自复制mRNA原液。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 北京悦康科创医药科技股份有限公司 自复制mRNA原液工业化生产及分离纯化方法及其应用
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