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申请/专利权人：江西中医药大学
申请日：2024-03-29
公开（公告）日：2024-05-17
公开（公告）号：CN118048437A
主分类号：C12Q1/6816
分类号：C12Q1/6816
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.04#实质审查的生效;2024.05.17#公开
摘要：本发明提出一种基于CRISPRCas12a和AuNBPs形貌变化的肿瘤标志物多色可视化检测方法，该方法包含以下步骤：1酶连报告探针的制备；2CRISPRCas12a非特异切割；3多色彩可视化分析。本发明结合CRISPRCas12a和贵金属纳米材料局域表面等离子体共振特性，构建了一种快速便携式诊断肿瘤标志物的检测方法。本方法检测成本低，操作简单，无需复杂检测设备，重现性和稳定性好，能够直接通过肉眼对癌症生物标志物进行半定量分析，有望在生命科学和临床检验等领域得到广泛应用。
主权项：1.一种基于CRISPRCas12a和AuNBPs形貌变化的肿瘤标志物多色可视化检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：1酶连报告探针制备：将生物素-RP-生物素与MB--链霉亲和素进行第一次孵育，第一次孵育完成后，进行第一次洗涤；第一次洗涤完成后，再加入链霉亲和素化的辣根过氧化物酶进行第二次孵育，第二次孵育完成后，依次进行磁分离、第二次洗涤和分散操作，得到MB-RP-HRP探针；2CRISPRCas12a非特异性切割：将MB-RP-HRP探针、靶标DNA和CRISPRCas12a复合物混合均匀并进行第三次孵育，第三次孵育完成后，通过磁分离收集上清液中被切割下来的HRP；3多色彩可视化分析：将含有HRP的上清液与TMB双组分显色试剂进行反应，之后再加入HCl终止酶促反应，得到混合溶液；将AuNBPs溶液添加到混合溶液进行蚀刻反应，反应完成后，直接通过肉眼观察溶液颜色来对目标物进行定性和定量分析检测，得到检测结果。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 江西中医药大学 基于CRISPR/Cas12a和AuNBPs形貌变化的肿瘤标志物多色可视化检测方法
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