申请/专利权人：中国科学院微生物研究所;广西科学院

申请日：2022-05-23

公开（公告）日：2024-05-17

公开（公告）号：CN114854807B

主分类号：C12P19/12

分类号：C12P19/12;C12P19/18;C12N15/70;C12N15/54;C12N1/21;C12R1/19

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.17#授权;2022.08.23#实质审查的生效;2022.08.05#公开

摘要：本发明属于生产海藻糖六磷酸的技术领域。本发明提供了一种生产海藻糖六磷酸的方法，包括如下步骤：重组工程菌TY001和重组工程菌TY002分别接种至含有50μgml链霉素的2YT液体培养基中培养至OD为0.8；加入阿拉伯糖至终浓度为0.2mM，诱导培养后离心得菌体沉淀；配置催化反应体系；所述反应体系中含有浓度为4ODml的重组工程菌TY001、浓度为4ODml的重组工程菌TY002、浓度为100mM的蔗糖、浓度为100mM的葡萄糖六磷酸、浓度为100mM的尿苷二磷酸；催化反应体系在37℃和220rpm条件下催化反应6小时得海藻糖六磷酸。本发明的方法能催化生成海藻糖六磷酸，开拓了生化催化生成海藻糖六磷酸的新方法。

主权项：1.生产海藻糖六磷酸的方法，其特征在于，包括如下步骤：重组工程菌TY001和重组工程菌TY002分别接种至含有50μgml链霉素的2YT液体培养基中培养至OD为0.8；加入阿拉伯糖至终浓度为0.2mM，诱导培养后离心得菌体沉淀；配置催化反应体系；所述反应体系中含有浓度为4ODml的重组工程菌TY001、浓度为4ODml的重组工程菌TY002、浓度为100mM的蔗糖、浓度为100mM的葡萄糖六磷酸、浓度为100mM的尿苷二磷酸；催化反应体系在37℃和220rpm条件下催化反应6小时得海藻糖六磷酸；所述重组工程菌TY001的制备方法，包括如下步骤：将pBAD-hisB载体的XhoⅠ和SpeⅠ酶切位点间的片段替换为序列表中SEQIDNO.2所示的DNA分子，得到重组表达载体pBAD-SS；将重组表达载体pBAD-SS导入大肠杆菌BW25113，得到重组工程菌TY001；所述重组工程菌TY002的制备方法，包括如下步骤：将pBAD-hisB载体的XhoⅠ和SpeⅠ酶切位点间的片段替换为列表中SEQIDNO.4所示序列的DNA分子，得到重组表达载体pBAD-TPS；将重组表达载体pBAD-TPS导入大肠杆菌BW25113，得到重组工程菌TY002。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 中国科学院微生物研究所;广西科学院 一种生产海藻糖六磷酸的方法

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