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申请/专利权人：辽宁省农业科学院
申请日：2021-09-09
公开（公告）日：2024-05-17
公开（公告）号：CN113736864B
主分类号：C12Q1/6858
分类号：C12Q1/6858;C12Q1/6895;C12N15/11
优先权：
专利状态码：有效-授权
法律状态：2024.05.17#授权;2021.12.21#实质审查的生效;2021.12.03#公开
摘要：本发明公开了大葱杂交种的鉴定方法，尤其涉及一种快速鉴定大葱杂交种纯度的方法，特别试用与已知父母本，需要鉴定F1代种子的纯度，它属于种子鉴定技术领域。一种快速鉴定大葱杂交种纯度的方法，采用KASP标记对大葱杂交种纯度进行鉴定。本发明只需提取大葱总DNA进行批量PCR扩增，然后进行批量实验，节省了大量人力，而且特别试用于大量样本的操作。本发明方法能够方便、快捷、准确的鉴定出大葱杂交种的纯度。
主权项：1.一种快速鉴定大葱杂交种纯度的方法，其特征在于采用KASP标记对大葱杂交种纯度进行鉴定，其步骤如下：a.提取待检测大葱DNA；b.将样本DNA浓度稀释后转移至384PCR板中；c.配制KASPPCR反应体系；d.将配制好的KASPPCR反应体系放入步骤b的384PCR板中快速离心，用硅胶盖盖严防止PCR反应时液体蒸发；e.将384PCR板放入PCR仪中进行PCR反应；f.将反应完成后的PCR板快速离心后，用OMEGAFSNP分型检测仪进行扫描分析，分析完成后即可分辨出待检测大葱样品；步骤c中所述的配制KASPPCR反应体系具体步骤如下：反应体系总体积5ul，包括2ulDNA、2ul2×PARMSPROMIX、0.056ulKASPassaymix、ddH20补至1ul；KASP标记的引物核苷酸序列为：No.182F1，引物核苷酸序列为No.182F1、No.182F2和No.182R所示的引物，引物序列No.182F1、No.182F2和No.182R如下：No.182F1:下划线部分为HEX荧光标序列， GAAGGTCGGAGTCAACGGATTTGCCGCCCTCTCTGTGTAA；No.182F2:下划线部分为FAM荧光标序列， GAAGGTGACCAAGTTCATGCTTGCCGCCCTCTCTGTGTAG；No.182R:GCATTTCGTCATGGAGCTTTG。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 辽宁省农业科学院 一种快速鉴定大葱杂交种纯度的方法
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