申请/专利权人:中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
申请日:2024-01-29
公开(公告)日:2024-05-17
公开(公告)号:CN117646032B
主分类号:C12N15/85
分类号:C12N15/85;C12N15/64;C12N7/00;A61K39/265;A61P31/22;C12R1/93
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.05.17#授权;2024.03.22#实质审查的生效;2024.03.05#公开
摘要:BHV‑1的反向遗传操作系统及其在病毒拯救中的应用,属于病毒遗传操作技术领域。为解决现有BHV‑1的基因编辑方法存在效率低、耗时长、重组病毒纯化困难等问题,本发明通过将BHV‑1基因组剪切后分段克隆入Fosmid粘粒载体pCC1Fos,构建了BHV‑1基因组Fosmid文库;在对该文库进行基因组测序的基础上,从中挑选出5个克隆有BHV‑1基因组片段,且相互含有重叠区域,并可以拼接覆盖BHV‑1全基因组的重组粘粒;用这5个粘粒共转染人胚胎肾细胞,成功拯救BHV‑1,获得了BHV‑1的反向遗传操作系统。
主权项:1.一种BHV-1的反向遗传操作系统,其特征在于,包含分别含有BHV-1病毒基因组1-41592nt,54764-91064nt,99753-135460nt,22588-61504nt和65620-102129nt核苷酸序列的5个重组粘粒,所述5个重组粘粒是通过将BHV-1基因组1-41592nt,54764-91064nt,99753-135460nt,22588-61504nt和65620-102129nt核苷酸序列分别与pCC1Fos载体连接获得的,所述BHV-1全基因组序列的GeneBank登录号为NC001847。
全文数据:
权利要求:
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