申请/专利权人：陕西中鸿科瑞再生医学研究院有限公司

申请日：2021-06-18

公开（公告）日：2024-05-17

公开（公告）号：CN113244272B

主分类号：C12N5/0775

分类号：C12N5/0775;A61K35/48;C12N5/074;A61P15/08

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.17#授权;2021.08.31#实质审查的生效;2021.08.13#公开

摘要：本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种用于改善卵巢早衰的组合物及其制备方法和应用。本发明提供的一种用于改善卵巢早衰的组合物，将体外构建的人子宫内膜干细胞细胞膜片与间充质干细胞外泌体复合使用，能促进卵泡发育，促进卵巢分泌抗缪勒管激素，调节促卵泡生成素水平、抑制卵巢细胞凋亡，改善卵巢储备功能不良性疾病，改善原发性或者继发性卵巢早衰的效果好，为临床用于治疗卵巢功能不全、多囊卵巢综合征提供新的思路。

主权项：1.改善卵巢早衰的组合物的应用，其特征在于，所述组合物用于制备治疗原发性或继发性的卵巢储备功能不良的药物，或者用于制备治疗多囊卵巢综合征的药物；改善卵巢早衰的组合物的的制备方法包括：子宫内膜干细胞细胞膜片的制备：选用低代数的人子宫内膜干细胞接种于子宫内膜干细胞培养基中培养，培养8-15h后弃掉原有培养基，换成细胞膜片诱导液持续培养，间隔1-2d换一次细胞膜片诱导液，待培养基中出现半透明的细胞膜片，则将其收集，作为子宫内膜干细胞细胞膜片，备用；所述的低代数人子宫内膜干细胞代数为0-10代；间充质干细胞外泌体的制备：间充质干细胞培养至密度为80%-85%时，换无血清培养基继续培养48-72h，之后收集上清液，提取其中的间充质干细胞外泌体，间充质干细胞外泌体浓度≥0.45mgmL；子宫内膜干细胞细胞膜片与间充质干细胞外泌体的复合：将新鲜制备的人子宫内膜干细胞细胞膜片破碎后与间充质干细胞外泌体混合，得到用于改善卵巢早衰的组合物；所述间充质干细胞为脐带间充质干细胞；所述上清液的具体制备方法如下：将间充质干细胞以1-2×105cm2密度接种于间充质干细胞培养基内培养，待生长至密度为80%-85%时，弃掉原有培养基后磷酸盐缓冲液清洗细胞表面，换无血清培养基继续培养48-72h，无菌环境下收集上清液；将所述培养上清依次经过300-500×g离心、10000-12000×g离心及100000-120000×g离心后，取最后一次沉淀，用生理盐水悬浮，即可得到间充质干细胞外泌体。

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权利要求：

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