申请/专利权人：扬州大学

申请日：2023-06-05

公开（公告）日：2024-05-17

公开（公告）号：CN116584389B

主分类号：A01H4/00

分类号：A01H4/00

优先权：

专利状态码：有效-授权

法律状态：2024.05.17#授权;2023.09.01#实质审查的生效;2023.08.15#公开

摘要：本发明涉及一种水芹的组培快繁方法，所述水芹的组培快繁方法包括以下步骤：步骤1）、选取水芹幼嫩叶茎的腋芽作为外植体；步骤2）、消毒后接种到基本MS培养基上形成无菌苗；步骤3）、选取生长状况良好的无菌苗，剪取其叶柄后接种至愈伤组织诱导培养基获取愈伤组织，步骤4）、后转接至从生芽继代增值培养基中获得大量从生芽；步骤5）、丛生芽最后接种于分化成株诱导培养基中形成水芹再生苗。通过本发明，可用于快速获得水芹愈伤组织和组培苗，对水芹工厂化生产及水芹扩繁和科研需求具有重要意义。

主权项：1.一种水芹的组培快繁方法，其特征是，包括以下步骤：步骤1）、选取水芹幼嫩叶茎的腋芽作为外植体，并对外植体消毒；步骤2）、外植体消毒后接种到基本MS培养基上形成无菌苗；步骤3）、选取生长状况良好的无菌苗，剪取其叶柄后接种至愈伤组织诱导培养基获取愈伤组织；步骤4）、后转接至从生芽继代增殖培养基中获得大量从生芽；步骤5）、丛生芽最后接种于分化成株诱导培养基中形成水芹再生苗；步骤1）具体为：外植体消毒：取生长旺盛带腋芽的水芹嫩茎3~4cm，放入250ml的烧杯中，用清水清洗两遍，然后流水冲洗60min；冲洗完成后加入75％浓度无水乙醇洗涤灭菌30s，倒掉乙醇，再用20％浓度的已加入1~2滴吐温的次氯酸钠溶液洗涤灭菌两次，第一次灭菌2min，第二次灭菌20min；步骤2）具体为：外植体接种方法：将外植体置于已通过紫外消毒好的超净工作台中，倒掉次氯酸钠溶液，用无菌水反复冲洗4次；将外植体放于已消毒的培养皿上，用吸水纸吸净外植体多余水分，剪取腋芽接种到基础MS培养基上，接种时腋芽生长方向需朝向瓶口，每瓶接种2~3个腋芽；光下培养：将接种好的培养瓶放置于光照培养箱中进行培养，经30d获得水芹无菌苗；其中光照培养箱的光周期为16h光照、8h黑暗，光照培养箱的温度为25℃；步骤3）具体为：愈伤组织诱导：于超净工作台上剪取50mm的健壮无菌苗叶柄30~40个，平铺在装有培养基的培养皿上，培养基配方为B5+0.5mgL2,4-D+1.0mgL6-BA+100mgLSER；铺好之后及时用封口膜封好，放置于愈伤诱导培养箱中25℃暗培养；步骤4）具体为：从生芽继代增殖培养：于超净工作台中对愈伤组织进行从生芽继代增殖培养，将水芹愈伤组织平铺在装有基础MS培养基的培养皿上，每块培养皿中放置4~5个水芹愈伤组织，均匀平铺，用封口膜封好，放置于光照培养箱中暗培养20d，出现少量褐化现象，但不影响从生芽的增殖；步骤5）具体为：分化成株诱导：暗培养20d后，水芹愈伤组织都长出幼嫩的丛生芽，于超净工作台中将从生芽接种到含有基础MS培养基的培养瓶中，接种时丛生芽的生长方向需朝向瓶口，每瓶MS培养基接种3个从生芽，放置于光照培养箱中生长，生长条件为16h光照、8h黑暗、温度25℃，经40d后，水芹再生苗生长健壮，颜色鲜绿。

全文数据：

权利要求：

百度查询： 扬州大学 一种水芹的组培快繁方法

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