申请/专利权人:深圳华大生命科学研究院
申请日:2020-09-10
公开(公告)日:2024-05-17
公开(公告)号:CN114171121B
主分类号:G16B30/10
分类号:G16B30/10
优先权:
专利状态码:有效-授权
法律状态:2024.05.17#授权;2022.03.29#实质审查的生效;2022.03.11#公开
摘要:本发明公开了一种mRNA5’3’末端差异的快速检测方法。所述方法先利用HISAT2将对照组与实验组测得的read比对到GRCh38参考序列上,通过序列注释信息,选取基因间区的片段进行后续分析,然后利用read间的重叠序列,将read逐一组装在一起,形成基因的5’或3’延长序列,之后根据基因的mRNA5’或3’延长序列,形成同种型转录本,比较实验组与对照组,如果满足实验组的长度长于对照组的长度200nt以上且FPKM实验组FPKM对照组的比值大于等于2的条件,则提取实验组相对于对照组特有的转录本,作为下游分析数据。本发明有效解决了现有mRNA片段组装的错误问题,提高了差异分析的可信性,实现了对实验组特定转录本的快速查找,使转录组数据进一步反应了研究对象的客观真实性。
主权项:1.一种mRNA5’3’末端差异的快速检测方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1,利用HISAT2将对照组与实验组测得的read比对到GRCh38参考序列上,通过序列注释信息,选取基因间区的片段进行后续分析;步骤2,设置FPKMbin与FPKMext两个参数,FPKMbin代表每个bin单元read表达量,FPKMext代表延伸总长的read表达量,FPKMbin与FPKMext均大于1,利用read间的重叠序列,将read逐一组装在一起,形成基因的5’或3’延长序列;步骤3,根据基因的mRNA5’或3’延长序列,形成同种型转录本,比较实验组与对照组,如果满足实验组的长度长于对照组的长度200nt以上且FPKM实验组FPKM对照组的比值大于等于2的条件,说明实验组与对照组末端差异显著,则提取实验组相对于对照组特有的转录本,作为下游分析数据;如果不满足实验组的长度长于对照组的长度200nt以上且FPKM实验组FPKM对照组的比值大于等于2的条件,说明实验组与对照组末端差异不显著,则不进行后续分析。
全文数据:
权利要求:
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