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申请/专利权人：湖南农业大学
申请日：2024-01-30
公开（公告）日：2024-05-14
公开（公告）号：CN118033126A
主分类号：G01N33/553
分类号：G01N33/553;G01N21/31;G01N33/545;G01N33/543;G01N33/531;G01N33/53
优先权：
专利状态码：在审-实质审查的生效
法律状态：2024.06.04#实质审查的生效;2024.05.14#公开
摘要：本发明涉及免疫生物传感器制备技术领域，具体涉及一种检测黄曲霉毒素B1的免疫生物传感器及制备方法及其应用。本发明利用连接了黄曲霉毒素B1适配体的Ag@AuNPs作为信号探针与固定在96微孔板的黄曲霉毒素B1抗体和抗原构成夹心结构，加入硝酸刻蚀剂后引发被锚定的Ag@AuNPs崩解，产生大量的Ag+来调控作为信号底物的GSH‑MnO2NSs‑TMB系统，从而实现二次信号扩增。最后，根据TMB的蓝色氧化产物的量，实现比色信号检测。本方法不仅克服了酶的缺陷，还通过双重信号放大提高了灵敏度，具有裸眼可视化、操作简单和检测准确性高等特点，能应用于被污染食品中AFB1的检测。
主权项：1.一种检测黄曲霉毒素B1的免疫生物传感器，其特征在于，所述免疫生物传感器包含Ag@AuNPs-AFB1适配体信号探针和二氧化锰纳米片；所述Ag@AuNPs-AFB1适配体信号探针的制备方法包含以下步骤：1Ag@AuNPs的制备：将氯金酸溶液、亚硫酸钠溶液和氢氧化钠溶液混合静置10-12h得到镀金种子液；将甘油与水的混合物在106℃下搅拌25-30min，之后加入硝酸银与柠檬酸钠后反应1-2h，制得准球形银纳米颗粒种子液；将甘油与聚乙烯吡咯烷酮-10混于纯水，在25摄氏度搅拌15-20min，加入制得的所述准球形银纳米颗粒种子液孵育15-20min，孵育完毕后，再加入硝酸银与一水合氨的混合物和抗坏血酸反应1-2h后得到大尺寸银纳米颗粒；在含有所述大尺寸银纳米颗粒的溶液中加入聚乙烯吡咯烷酮-10、抗坏血酸、氢氧化钠、亚硫酸钠以及所述镀金种子液，将最终混合物在35-45℃下孵育过夜，通过在离心分离纯化得到Ag@AuNPs；2Ag@AuNPs-适配体的制备：将AFB1适配体使用三2-羧乙基膦激活后与所述Ag@AuNPs混合后在4-6℃下孵育，除杂得到所述Ag@AuNPs-AFB1适配体信号探针。
全文数据：
权利要求：
百度查询： 湖南农业大学 一种检测黄曲霉毒素B1的免疫生物传感器及制备方法及其应用
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