申请/专利权人：新羿制造科技(北京)有限公司

申请日：2024-03-05

公开（公告）日：2024-05-14

公开（公告）号：CN118028532A

主分类号：C12Q1/70

分类号：C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93

优先权：

专利状态码：在审-实质审查的生效

法律状态：2024.05.31#实质审查的生效;2024.05.14#公开

摘要：本发明提供引起脑炎、脑膜炎病原体的数字PCR检测系统，所述系统包括预扩增系统和数字PCR检测系统，所述预扩增系统将巨细胞病毒、EB病毒、单纯疱疹病毒1型和2型、人类疱疹病毒6型、水痘病毒、肠道病毒、乙脑病毒和腮腺炎病毒的引物探针组合到一管体系中，可实现多种病原体的核酸同时进行富集；富集后的产物进行数字PCR检测，可同时得到多种病原体的定量结果。在本发明中增加了样本的一管预扩增过程，指数级增大样本中病原体核酸的拷贝数，提高了检测的灵敏度，可为中枢神经系统感染的治疗提供精准、快速地判断依据。

主权项：1.引起脑炎、脑膜炎病原体的数字PCR检测系统，其特征在于，所述系统包括：预扩增系统，所述预扩增系统将巨细胞病毒、EB病毒、单纯疱疹病毒1型和2型、人类疱疹病毒6型、水痘病毒、肠道病毒、乙脑病毒和腮腺炎病毒的引物探针组合到一管体系中，并加入内参引物，组成九重预扩增体系，所述预扩增系统是Tth酶扩增体系，该体系可以实现包括DNA和RNA在内的多种不同核酸的同时扩增，所述预扩增体系中含有UNG酶；数字PCR检测系统，所述数字PCR检测系统包括巨细胞病毒、EB病毒、单纯疱疹病毒1型和2型、人类疱疹病毒6型和内参基因的A管数字PCR检测体系；和水痘病毒、肠道病毒、乙脑病毒、腮腺炎病毒和内参基因的B管数字PCR检测体系，所述扩增检测系统中不含有UNG酶；其中所述靶标的引物探针序列如下： 靶标 引物探针名称 序列5′-3′ 序列号 巨细胞病毒 CMV-F CAAAAACGTTGCTGGAACGC SEQIDNo.1 巨细胞病毒 CMV-R GCCCAGCTATAGGTCCCG SEQIDNo.2 巨细胞病毒 CMV-P CTGCGAGTAAAGTTCCAGTACCCTG SEQIDNo.3 EB病毒 EB-F GTTCACCTTCAGGGGTAAGTAAC SEQIDNo.4 EB病毒 EB-R GCTTAGTATACATGCTTCTTGCTTTTC SEQIDNo.5 EB病毒 EB-P ggtgGACCTCTCCAGGGCTCACATAAAGcacc SEQIDNo.6 单纯疱疹病毒12型 HSV-12-F CTGCGTTCGACCAGGC SEQIDNo.7 单纯疱疹病毒12型 HSV-12-R GTCGTTCTTCGGTGCCTTC SEQIDNo.8 单纯疱疹病毒12型 HSV-12-P CTCGCGGCCATAGCAACCGACG SEQIDNo.9 人类疱疹病毒6型 HHV-6-F CGTCTTTGATGTCCGTAGC SEQIDNo.10 人类疱疹病毒6型 HHV-6-R CTTACTAGAAGGTCGCAATCG SEQIDNo.11 人类疱疹病毒6型 HHV-6-P GTTGTCCGCAGCGCTGTGTG SEQIDNo.12 水痘病毒 VZV-F CGTGTATACAAACAAAGCCTGC SEQIDNo.13 水痘病毒 VZV-R GTTGAGCACAGAGACCTTATTTTG SEQIDNo.14 水痘病毒 VZV-P CCTGCAAGCGGTTTAGCATTTTAACG SEQIDNo.15 肠道病毒 EV-F GCTGATGAGTCTGGACGTC SEQIDNo.16 肠道病毒 EV-R GGATGGACACCGGGTTTCG SEQIDNo.17 肠道病毒 EV-P ctcCACCGGTGACGGTGGTCCAGGgag SEQIDNo.18 乙脑病毒 JeV-F CAACATTATGCGGCCCAAG SEQIDNo.19 乙脑病毒 JeV-R CCTGATCTCCAATCTCCTCTGG SEQIDNo.20 乙脑病毒 JeV-P CCTCGAAGCTGTAGAGGAGGTGG SEQIDNo.21 腮腺炎病毒 MuV-F GTCTGGATTATATTAACTGTTACTTATAAG SEQIDNo.22 腮腺炎病毒 MuV-R GTGACCTCAAAGCTAGTGAGTG SEQIDNo.23 腮腺炎病毒 MuV-P CGGTGCGACATGCAGCACTG SEQIDNo.24

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