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【发明公布】预防治疗无乳链球菌和牛支原体所致疾病的疫苗及其制备方法与应用_中国农业大学_202410130102.9 

申请/专利权人:中国农业大学

申请日:2024-01-30

公开(公告)日:2024-05-14

公开(公告)号:CN118021944A

主分类号:A61K39/09

分类号:A61K39/09;A61K39/385;A61P31/04

优先权:

专利状态码:在审-实质审查的生效

法律状态:2024.05.31#实质审查的生效;2024.05.14#公开

摘要:本发明公开了预防治疗无乳链球菌和牛支原体所致疾病的疫苗,所述疫苗的活性称为GBSCPS‑rP48,所述GBSCPS‑rP48是无乳链球菌荚膜多糖提取物和蛋白质rP48偶联得到的物质。采用本发明的疫苗,经3针肌肉注射后,可诱导模型动物产生强特异性抗体滴度,具有双重保护性能,一针可防两病,简化免疫程序,减少免疫次数,降低动物的应激,也节省了劳动力,进一步降低了动物养殖的成本。

主权项:1.预防和或治疗无乳链球菌和牛支原体所致疾病的疫苗,其特征在于:所述疫苗的活性称为GBSCPS-rP48,所述GBSCPS-rP48是无乳链球菌荚膜多糖提取物和蛋白质rP48偶联得到的物质;所述无乳链球菌荚膜多糖提取物按照包括如下步骤的方法制备:用溶菌酶剥离无乳链球菌的荚膜多糖,得到酶解液,对所述酶解液进行离心,收集上清液,所述上清液去除蛋白质后用去离子水透析,得到无乳链球菌荚膜多糖粗提液,将所述无乳链球菌荚膜多糖粗提液通过超滤更换溶剂为pH7.020mMTri-HCl0.25MNaCl,得到待纯化的无乳链球菌荚膜多糖液;对所述待纯化的无乳链球菌荚膜多糖液进行阴离子交换柱层析,收集洗脱峰;所述阴离子交换柱层析中所采用的阴离子交换基团是-CH2-N+-CH33,所采用的洗脱程序为两步洗脱,所述两步,第一步洗脱用pH7.020mMTri-HCl0.25MNaCl作为洗脱液,第二步洗脱用pH7.020mMTri-HCl1MNaCl作为洗脱液;将阴离子交换柱层析获得的洗脱峰进行进行凝胶过滤层析,收集含多糖的洗脱峰,得到无乳链球菌荚膜多糖提取物;所述凝胶过滤层析所用的层析介质的分离范围包括10-600KD;所述pH7.020mMTri-HCl0.25MNaCl由溶剂和溶质组成的pH值为7.0的溶液,溶剂为20mMTri-HCl缓冲液,溶质为NaCl且其在溶液中的浓度为0.25M;所pH7.020mMTri-HCl1MNaCl由溶剂和溶质组成的pH值为7.0的溶液,溶剂为20mMTri-HCl缓冲液,溶质为NaCl且其在溶液中的浓度为1M;所述蛋白质rP48为如下A1或A2的蛋白质:A1其氨基酸序列如序列表中SEQIDNo.1所示;A2与A1具有98%以上同一性且来源于牛支原体的同源蛋白质。

全文数据:

权利要求:

百度查询: 中国农业大学 预防治疗无乳链球菌和牛支原体所致疾病的疫苗及其制备方法与应用

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